morfologi och utvecklingshastighet för Blåsflugan, Hemipyrellia ligurriens( Diptera: Calliphoridae): Forensic Entomology Applications
Abstract
Hemipyrellia ligurriens (Diptera: Calliphoridae) är en kriminaltekniskt viktig blåsflugaart som presenteras i många länder. I denna studie bestämde vi morfologin för alla stadier och utvecklingsgraden för H. ligurriens uppfödda under naturliga omgivningsförhållanden i Phitsanulok-provinsen, norra Thailand. Morfologiska egenskaper hos alla steg baserade på observation under ett ljusmikroskop beskrevs och demonstrerades för att användas för identifieringsändamål. Dessutom gavs utvecklingstid i varje steg. Utvecklingstiden för H. ligurriens för att slutföra metamorfos; från ägg, larva, pupa till vuxen tog 270,71 h för 1 utvecklingscykel. Resultaten från denna studie kan vara användbara inte bara för tillämpning i rättsmedicinsk undersökning, men också för studier i dess biologi i framtiden.
1. Inledning
exemplar av blåsflugor (Diptera: Calliphoridae), särskilt fluglarver som finns i lik och/eller vid dödsscener, kan användas som entomologiska bevis i rättsmedicinska undersökningar, det vill säga att uppskatta postmortemintervallet (PMI) och bestämma giftiga ämnen, antemortemtrauma och om flyttning av rester hade inträffat, som redan dokumenterats . Exakt morfologisk identifiering av insektsprover är en av mycket viktiga faktorer ur tillämpad synvinkel eftersom de ger relevanta bevis för rättsmedicinska undersökningar .
av blåsflugarter är Hemipyrellia ligurriens (Wiedemann) en kriminaltekniskt viktig blåsflugarter, som tidigare rapporterats från fall i Thailand och Malaysia . Denna flugsort distribueras i stor utsträckning och täcker Korea, Taiwan, Laos, Singapore, Papua Nya Guinea, Australien, Indien, Kina, Filippinerna, Sri Lanka, Malaysia, Indonesien och Thailand . Förutom dess rättsmedicinska betydelse kan H. ligurriens vara en olägenhet på marknader och trädgårdar, och vuxna är också mekaniska vektorer av patogener på grund av deras attraktion för mänsklig utsöndring nära mänskliga ockuperade miljöer . Tidigare har morfologi av vissa omogna steg (ägg, 3: e-instarlarver och puparium) av H. ligurriens endast studerats genom att observera under ett svepelektronmikroskop och ett ljusmikroskop . Av den anledningen är den tillgängliga informationen från H. ligurriens ofullständig för att identifiera alla omogna bevis som finns i dödsscenerna. Dessutom har utvecklingsgraden för denna art som är viktiga data för uppskattning av PMI inte hittats i de citerade litteraturerna. Dessutom är lokalbefolkningsspecifika utvecklingsdata mycket viktiga för att uppskatta larvåldern för att bestämma PMI . För att öka noggrannheten och precisionen vid tillämpning av denna information i rättsmedicinska undersökningar är studien av alla dess omogna stadier och utvecklingshastighet av stort intresse eftersom morfologin hos var och en kan ge specifika egenskaper som kommer att bli viktiga för en korrekt identifiering, och tillväxtdata i särskilt tillstånd kan ge väsentliga data för PMI-uppskattning. Därför syftade denna studie till att undersöka de särskiljande egenskaperna hos alla dess omogna stadier genom att observera under ljusmikroskopet, för att ge några viktiga detaljer för identifiering och för att bestämma dess utvecklingshastighet, särskilt i skick i Phitsanulok-provinsen, norra Thailand.
2. Material och metoder
2.1. Underhåll av H. ligurriens i laboratoriet
kolonin av H. ligurriens som användes i denna studie erhölls ursprungligen genom att samla vuxna flugor med ett svepande nät i områden i Sao Hin Village, Muang Phitsanulok district, Phitsanulok-provinsen, Thailand (16 44 ’18N, 100 13′ 44E). Alla vuxna av H. ligurriens samlades i fältet och identifierades baserat på deras morfologi, med hjälp av den taxonomiska nyckeln till Tumrasvin et al. , innan de uppföds vidare i laboratoriet. Flugor uppföddes under naturligt omgivande tillstånd i det öppna systemet uppfödningsrummet, enligt metoden för Sukontason et al. . I korthet upprätthölls vuxna i en uppfödningsbur (30 30 30 30 cm) och matades med 2 typer av mat: (i) en blandning av 10% (vikt/vikt) sockerlösning och 1,5% (V/v) multivitaminsiraplösning (SEVEN SEA, England) och (ii) färsk fläsklever. Färsk fläsklever tillhandahölls som larvmat och oviposition. Närvaron av ägg på fläsklever observerades dagligen. När ägg hittades överfördes fläskleveren med flugaägg försiktigt till en larvuppfödningslåda med hjälp av pincett, och sedan tillsattes 2 eller 3 stycken (50 g/dag) färsk fläsklever i lådan som mat för larverna. Vissa bitar av färsk fläsklever tillsattes dagligen tills larverna i lådan slutade mata och flytta eller de blev prepupalstadiet (sen 3: e instar). Alla bitar av fläsklever som återstod i uppfödningslådan togs bort från lådan. Endast puppor hölls i uppfödningslådan och förseglades tätt tills uppkomsten av vuxen hittades. Därefter placerades lådan och öppnades i en uppfödningsbur för att släppa vuxna från lådan för att bo i uppfödningsburen. Ny fluggenerering uppföddes kontinuerligt som nämnts ovan.
2.2. Morfologi
ägg
i denna studie erhölls äggprover av H. ligurriens från laboratoriekolonin för att undersöka distinkta egenskaper med användning av kaliumpermanganatfärgningstekniken, enligt tidigare beskrivning av Sukontason et al. . De viktigaste egenskaperna, såsom morfologi av medianområdet kring mikropylen och korionisk skulptur, observerades och fotograferades under ett ljusmikroskop (Olympus, Japan), som var ansluten till en digitalkamera (Samsung S700, Korea). Dessutom mättes bredden och längderna på 30 flugaägg också under det kalibrerade ljusmikroskopet. Medel-och standardavvikelse för bredd och längd analyserades med hjälp av Excel-programmet (Microsoft office Enterprise 2007).
Larva
Denna studie bestämde morfologin och utvecklingshastigheten i alla larvstadiet (1: a, 2: a och 3: e instars). Morfologi för alla instarer undersöktes med hjälp av hydroxidreningsmetoden. Kort sagt erhölls 30 larver av varje instar från laboratoriekolonin och offrades genom att placera dem i en bägare innehållande varmt vatten (80 kg C) i 30 sekunder för att förhindra att de krymper . Därefter bevarades de i en liten glasflaska innehållande 70% etanol. De bevarade larverna dissekerades individuellt på två platser för att erhålla tre kroppsdelar genom att använda ett skarpt blad under ett Stereomikroskop (Olympus, Japan), enligt den metod som beskrivs av Sukontason et al. . Det första snittet placerades över mitten av det andra bröstsegmentet för visning av det inre cephalopharyngealskelettet och yttre främre spiracle. Det andra snittet placerades över det 11: e kroppssegmentet för att observera egenskaperna hos den bakre spirakeln. Som en rensningsmetod lämnades varje par främre och bakre delar i en glasplatta innehållande 10% (w/V) kaliumhydroxidlösning under 1 dag (för 1: A instar) eller 2 dagar (för 2: A och 3: e instars). Därefter tvättades proverna två gånger med destillerat vatten och neutraliserades genom att placera dem på en glasplatta innehållande en blandning av 35% etanol och 1% isättika i 30 min. Därefter dehydratiserades proverna seriellt i 50%, 70%, 80%, 95%, och absolut etanol (RCI LABSCAN, Thailand) för 30 min per alkoholkoncentration. Dehydratiserade prover överfördes till en glasplatta innehållande xylen (PROLAB, Frankrike) och lämnades i 1 min innan de monterades på en glasskiva med 2-3 droppar monteringsmedium (Permount). En täckglidning placerades över varje prov. De permanenta glidbanorna lämnades i rumstemperatur i 2 dagar innan de observerades under ett ljusmikroskop. Cephalopharyngeal skelett och bakre spiracle i varje instar fotograferades under ljusmikroskopet, som var anslutet till digitalkameran. Dessutom undersöktes kroppslängden och bredden på alla instarer. Trettio av de första instarlarverna mättes med hjälp av ett kalibrerat mikroskop, medan den andra och tredje instaren (n = 30 larver/ varje instar) mättes med vernierkaliprar under ett dissekerande mikroskop. Medel-och standardavvikelse för deras kroppsbredd och längd analyserades med hjälp av Excel-programmet.
Pupa
i detta skede studerades morfologi för de främre och bakre delarna och färgförändringen. De främre och bakre delarna av puparia bestämdes med användning av kaliumhydroxidgrensningstekniken, som tidigare beskrivits av Sukontason et al. . De främre delarna av puparia var resterna av det kontrakterade huvudet till det fjärde segmentet av puparia efter att flugorna hade dykt upp. De rekryterades från uppfödningslådan som flugor redan hade dykt upp. För varje bakre del skars det kaudala segmentet av puparium med ett skarpt blad under stereomikroskopet och överfördes sedan med hjälp av pincett till samma glasplatta som den som användes för den främre delen. Därefter blöts de i 1% (v/v) diskmedel för att avlägsna ytartefakter och/eller fläsklevervävnader. Som en rensningsmetod lämnades de främre och bakre delarna i ett provrör innehållande 10% (w/V) kaliumhydroxidlösning och provröret överfördes till ett vattenbad som sattes vid en temperatur av 80 C i 1 h. Därefter utfördes provprocessen efter det som beskrivits för larvstadiet. De viktiga egenskaperna hos främre och bakre delar observerades och fotograferades under ljusmikroskopet, anslutet till digitalkameran. Antal papiller i varje bakre spiral av 30 främre delar räknades och beräknades för sitt intervall. Dessutom mättes trettio puparia för deras bredd och längd med hjälp av vernier-bromsok. Medel-och standardavvikelse för deras bredd och längd analyserades med hjälp av Excel-programmet. För observation av färgförändring, endast en puparium som representerade färgen på puparia i uppfödningslådan valdes och fotograferades vid 0, 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, och 24 h genom att använda digitalkameran. Innan du fotograferade tvättades puparium i destillerat vatten för att avlägsna ytartefakter.
vuxen
de unga vuxna, 5-7days gamla, erhölls från uppfödningen bur med hjälp av ett provrör. De offrades genom att placera dem i kylskåp (-4 C. C.) I 2 timmar. därefter fästes de försiktigt med bra anatomiskt arrangemang. De viktiga egenskaperna för identifiering undersöktes och fotograferades under stereomikroskopet, anslutet till digitalkameran. Dessutom mättes trettio vuxna för kroppsbredd och längd med hjälp av vernier-bromsok. I denna studie betyder kroppsbredd bredden på det 2: a bröstsegmentet, och kroppslängden är hela längden på kroppen, allt från det mellersta sammansatta ögat till det sista segmentet av buken. Medel-och standardavvikelse för deras kroppsbredd och längd analyserades med hjälp av Excel-programmet.
2, 3. Bedömning av utvecklingshastighet
för bedömning av utvecklingshastigheten utfördes experimenten i det öppna systemet uppfödningsrummet under den naturliga omgivningstemperaturen i Phitsanulok-provinsen, norra Thailand. Temperatur och relativ fuktighet registrerades dagligen med hjälp av en termometer och hygrometer (Thermo-Hygro TM870, Kina). Intervallen (medelvärde av den registrerade temperaturen och den relativa luftfuktigheten som användes för att bestämma utvecklingsgraden för denna fluga var 26,7 0,61 0,61 C och 74 3%. För varje experiment började utvecklingsgraden vid upptäckt av nykläckta larver (eller 1: a instar); prepupalstadiet betecknade slutpunkten. De nykläckta larverna erkändes som 0 h gamla larver. Bedömning av utvecklingsgraden i denna studie studerades genom att separera de nykläckta larverna från samma vuxna flygkoloni i 3 grupper. Varje grupp bestod av 150-200 nykläckta larver. De överfördes försiktigt från uppfödningslådan till den nya genom att använda en våt pensel (nummer 4). Färsk fläsklever (50 g) tillhandahölls dagligen som en matkälla för larverna i varje uppfödningslåda. De fem största larverna avlägsnades från uppfödningsboxen var 3: e timme. de offrades genom att placera i varmt vatten (80 80 C) i 30 sekunder för att förhindra larvkrympning och bevarades i en liten glasflaska innehållande 70% etanol. Alla bevarade larver mättes kroppslängder med hjälp av ett kalibrerat mikroskop eller vernierkaliper under ett dissekerande mikroskop, beroende på deras storlek. Förhållandet mellan larvkroppslängder och utvecklingstid analyserades med hjälp av Excel-programmet. Dessutom registrerades och analyserades livslängden i andra steg med hjälp av Excel-programmet.
3. Resultat
3.1. Morfologi
ägg
ägget av H. ligurriens var långsträckt och avsmalnande i både främre och bakre ändar (Figur 1(a)). Den mättes 1,44 0,11 mm i längd och 0,47 0,04 mm i bredd (Tabell 1). Det tog tid i detta skede för 10,3 0,30 timmar innan ruggning för att vara larvstadiet (Tabell 1). Det ostabila ägget var krämvitt; medan de efter färgning med 1% kaliumpermanganat var ljusbruna i färg. Medianområdet var placerat dorsalt och placerade en Y-form som sträckte sig från den främre änden till nästan den bakre änden (Figur 1(b)). Kläckningslinjen var upprätt och visade därmed mörk förtjockning längs medianområdet(Figur 1 (a)). Den korioniska skulpturen framträdde som ett sexkantigt mönster, med sin retikulära gräns något upplyftande som ett nät (Figur 1(c)).
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ägg av Hemipyrellia ligurriens färgade med 1% kaliumpermanganat. (A) hela ägg; MA: medianområde. (b) främre änden av ägget som visar bifurcated plastron och micropyle; M: micropyle. (C) extern korionisk skulptur som visar sexkantigt mönster, med sin retikulära gräns något upplyftande som ett nät. Bars = 100 m för alla siffror.
Larva
under observation med stereomikroskopet visade alla larvinstarer av H. ligurriens typisk muskoidformad vermiform larva som var spetsad i främre och trubbig i bakre. Det kaudala segmentet hade ett enda par bakre spiraklar. Den första instaren var relativt liten och mätte 2,62 0,70 mm i längd och 0,75 0,35 mm i bredd, med utvecklingstiden i detta skede för 12 0,1 h (Tabell 1). Det cephalopharyngeala skelettet var inte välutvecklat(Figur 2 (A)), medan den bakre spirakeln hade 2 spirakulära slitsar som sammanfogade ventralt(Figur 2 (e)). Den andra instaren var 6,24 1,67 mm i längd och 1,37 0,19 mm i bredd, med 12 3 h i detta steg (Tabell 1). Det cefalofaryngeala skelettet var nästan fullständigt(Figur 2 (b)), medan den bakre spirakeln hade 2 separerade spirakulära slitsar med svagt Pigmenterad ofullständig peritreme(Figur 2 (f)). Storleken på den 3: e instaren var den största och mätte 12,18 1,31 mm i längd och 2,32 0,19 mm i bredd. Utvecklingstiden var också den längsta i detta skede, var 84 3 timmar (Tabell 1). Cephalopharyngeal skelett i början och slutet av 3: e instar var liknande (figurerna 2(c) och 2(d), resp.). De bakre spiraklerna i det tidiga (Figur 2 (g)) och sena 3: e instar(Figur 2 (h)) var likartade, med 3 separerade spirakulära slitsar och fullständig peritreme med en interslitprojektion, förutom den senare som visar en högpigmenterad peritreme(Figur 2 (h)). De särdragen hos alla tre instarerna sammanfattades i Tabell 2.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Cephalopharyngeal skelett och bakre spiracles av Hemipyrellia ligurriens larver. Cephalopharyngeal skelett av (A) 1: A instar, (b) 2: a instar, (c) tidigt 3: e instar,. och (d) sent 3: e instar. Bakre spiracles av (e) 1: A instar, (f) 2: a instar, (g) tidigt 3: e instar och (h) sent 3: e instar. Bars = 100 m för alla siffror.
Pupa
pupariet för H. ligurriens var av typisk koarctatform (Figur 3), som mätte 6,82 kg 0.27 mm i längd och 2,76 0,11 mm i bredd (Tabell 1). Observerade färgförändringar avslöjade att det tidiga pupariumet var krämvitt i färg (0 h), med den bakre änden fortfarande stympad (Figur 3(a)). Färgen på pupariet ändrades emellertid gradvis till ljusgul brun inom 3 timmar efter pupariering (Figur 3(b)) och sedan till brun efter cirka 15 timmar (Figur 3(f)). Färgen på puparium ändrades till mörkbrun efter cirka 18 timmars observation(Figur 3 (g)). Vid 24 timmar visade pupariet den mörkaste bruna färgen(Figur 3 (i)). Varaktigheten för hela pupalstadiet var 152,5 30,7 h (Tabell 1).
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
(i)
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
(i)
Color changes in puparia of Hemipyrellia ligurriens up to 24 h after pupariation. Puparium (a)–(i) at 0, 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, and 24 h, respectively. Bars = 100 𝜇m for all figures.
Observation av de främre och bakre delarna av puparia uppträdde som en ljusgul-brun färg efter behandling med 10% kaliumhydroxid. Den främre plattan, pressad med en täckglidning, var trapezformad med 2 främre spiraklar placerade i båda övre ändarna (Figur 4(A)). Varje främre spirakel bestod av 5 till 7 papiller (Figur 4(b)). Ryggraden observerad i det tredje segmentet visade rader med enspetsiga spetsar (Figur 4(c)). Varje bakre Spiral uppträdde tre högpigmenterade mörkbruna spirakulära slitsar, med högpigmenterad knapp och svagt Pigmenterad peritreme (Figur 4(d)).
(a)
(b)
(c)
(d)
(a)
(b)
(c)
(d)
Puparium of Hemipyrellia ligurriens after treating with 10% KOH. (a) Anterior plate with trapezoid shape. (b) Anterior spiracle with 6 papillae. (c) ryggmönster vid 3: e segmentet som visar enpunktsspets. (D) bakre spiracles. Bars = 100 m för alla siffror.
vuxen
vuxna H. ligurriens var 12,23 0,61 mm i längd, 2,85 0,25 mm i bredd (Tabell 1) och metallisk koppargrön i utseende, med gråaktig vit pollinos på den främre delen av bröstkorgen (figurerna 5(A) och 5(b)). Kvinnans huvud var dikoptisk, men den hos hanen var subholoptisk (figurerna 5(c) och 5(d)). Gråaktig ansiktspollinositet hittades hos båda könen(figurerna 5(c) och 5 (d)), och hela det tredje antennsegmentet var mörkbrunt eller orange ventralt(figurerna 5(c) och 5 (d)). Squama var vitaktig(Figur 5 (e)). Gena var täckt med svarta hår(Figur 5 (f)). Stamvenen var utan setulae(Figur 5 (g)). Två postsuturala akrostichala setae hittades på bröstkorgen (Figur 5(h)). Suprakonvexitet hittades piloshår(Figur 5 (i)). Alla ovanstående egenskaper var viktiga för identifiering av denna fluga vuxna.
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
(i)
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
(i)
Adults and important characteristics for identification of Hemipyrellialigurrien. (a) Dorsal view of the female. (b) Dorsal view of the male. (c) Frons of the female showing dichoptic eyes. (d) Frons of the male showing subholoptic eyes. (e) sidovy av den vuxna som visar vitaktig squamae (pil). (f) högre förstoring av huvudet som visar svarta hår på gena (pil). (g) vinge som visar stamvenen utan setulae (pil). (h) Dorsal thorax. (i) Pilose hår på suprakonvexiteten (pil). Bars = 200 m för alla siffror.
3.2. Bedömning av utvecklingsgraden
bedömningar av utvecklingsgraden för H. ligurriens bestämdes under undersökningsperioden, baserat på naturligt omgivande tillstånd i Phitsanulok-provinsen. Tillväxtkurvan för larvstadiet visade sigmoidform (Figur 6). Data om utvecklingsgraden för uppfödning avslöjade att utvecklingstiden från nykläckta larver till början av pupariation växer snabbt under en total period av 108 h. larver nådde sin maximala medianlängd vid 42 timmar i kg och pupariation inträffade vid 108 timmar. livslängden för alla steg sammanfattades också i Tabell 1.
4. Diskussion
Data relaterade till viktiga insektsegenskaper för snabb och tillförlitlig identifiering och utveckling i laboratoriet är avgörande förutsättningar för lämplig tillämpning i rättsmedicinska undersökningar. H. ligurriens är en kriminaltekniskt viktig blåsflugsart som har registrerats i rättsmedicinska fall i Malaysia och Thailand . Denna studie fokuserade på de viktiga egenskaperna för att identifiera alla stadier av H. ligurriens, baserat på observation under ljusmikroskopet och utvecklingstiden för varje steg i naturligt omgivande tillstånd med medeltemperaturer och relativ fuktighet, som var 26,7 0,61 0,61 C och 74 3%. Även om morfologi vid vissa stadier av H. ligurriens har studerats tidigare med hjälp av skanningselektronmikroskopet och ljusmikroskopet , gav denna studie mer detaljerad information om särdrag och nya ledtrådar för identifiering med hjälp av enkla tekniker för att öka noggrannheten och precisionen av rättsmedicinsk tillämpning i framtiden. Dessutom gav denna studie utvecklingsdata för H. ligurriens, som kan användas för att uppskatta PMI av lik på vilka denna flugsart har koloniserat.
korionisk skulptur samt bredd och längd på medianområdet rapporterades tidigare som en viktig egenskap för att identifiera flugaägget . Morfologin hos H. ligurriens-ägget, observerat i denna studie genom färgning med 1% kaliumpermanganat och observation under ljusmikroskopet, liknade den i tidigare arbete, som undersöktes med användning av skanningselektronmikroskopet . Därför bekräftade resultaten från denna studie effektiviteten av färgningsmetoden, initierad av Sukontason et al. , för identifiering av fluga ägg. De färgade äggen kunde observeras tydligt under ljusmikroskopet. När man jämförde data med tidigare studier var storleken på H. ligurriens ägg i denna studie större än för andra blåsflugor, såsom Lucilia cuprina, Ceylonomyia (= Chrysomya) nigripes och Aldrichina grahami; emellertid var dess storlek inte annorlunda än storleken på Chrysomya megacephala och Achoetandrus (= Chrysomya) rufifacies . Ändå kan storleken på flyägg inte användas som de primära egenskaperna för identifiering, enligt information från Erzinclioglu , som rapporterade att storleken på flyägg berodde på kostnivåerna. Därför bör identifiering av flugaägg använda egenskaper för plastrons bredd, morfologi för plastronområdet som omger mikropylen som huvudkriterier och använd storlek som en kompletterande egenskap för äggidentifiering .
baserat på våra referenser var denna studie den första studien som visade morfologi av cephalopharyngeal skelett och posterior spiracle i alla instar larver genom att observera under ljusmikroskopet. Cephalopharyngeal skelett och bakre spiracles av larver sågs tydligt som olika i varje instar. Resultaten av denna studie överensstämde med tidigare rapporter . Dessutom visade denna studie graden av pigmentering av peritreme i varje instar. Det kan vara en ny ledtråd för att skilja larvernas ålder, särskilt mellan tidig och sen instar. Med varje utvecklingsinstar som definitivt är annorlunda såväl som graden av pigmentering kan data från denna studie vara användbara för att identifiera larvstadierna och åldern för larver av denna slagfluga i detalj som nämnts ovan.
studie om morfologi av pupalstadiet gav resultaten som liknade de tidigare rapporterna . Resultaten från observation i färgförändringar vid tiden för H. ligurriens puparia rapporterades först i denna studie och kan vara ett annat nytt stödjande bevis för att bestämma åtminstone den ungefärliga åldern för puparia för ökad noggrannhet av PMI-värde.
denna studie visade några fotografier av särdrag för användning vid identifiering av vuxna H. ligurriens. Dessa fotografier av märkliga egenskaper från denna studie kan vara användbara för personer som inte känner till terminologin i de taxonomiska nycklarna. Nuvarande taxonomisk nyckel för identifiering av blåsflugsarter i Thailand gavs av Kurahashi och Bunchu . Med blotta ögon av en nonentomolog verkar vuxna H. ligurriens likna A. rufifacies i utseende. Därför kan risken för felidentifiering förekomma hos båda arterna, särskilt i Thailand eftersom A. rufifacies var den näst mest dominerande blåsflugsarten i Thailand, och sammanträffande av båda arterna i vissa provinser i detta land hittades .
denna studie var den första rapporten som gav utvecklingstid för H. ligurriens i alla steg. Resultaten visade att utvecklingstiden för H. ligurriens under naturliga förhållanden i denna studie (en medeltemperatur på 26,7 0,61 0,61 C och relativ fuktighet på 74 3%) var snabbare än för C. megacephala och A. rufifacies, som studerades vid en medeltemperatur på 27,4 C. C. Vidare var utvecklingstiden för varje steg av H. ligurriens annorlunda än C. megacephala och A. rufifacies. Utvecklingsgraden för varje art specificerades, även om de växte under samma eller relaterade förhållanden . Vidare, variation av utvecklingstider inom en blåsflugsart hittades i geografiskt olika populationer . De lokala befolkningsspecifika utvecklingsdata behövs för att uppskatta larvåldern för att bestämma PMI. Därför är data från denna studie mycket viktiga för vidare tillämpning, särskilt i Phitsanulok-provinsen.
Data, erhållna från både morfologiska egenskaper och utvecklingstid, uppfyller tidigare information och ger nya stödjande bevis för identifiering av denna slagflugart och tillämpning i rättsmedicinsk undersökning, särskilt när H. ligurriens är närvarande i mänskliga kadaver. Dessutom kan de vara användbara som basdata i sin biologiska studie i framtiden.
bekräftelser
denna studie stöddes huvudsakligen av ett bidrag till N. Bunchu från Medicinska fakulteten, Naresuan University, och en annan från Thailand Research Fund (MRG5280194). Författarna tackar också centre of Excellence in Medical Biotechnology, fakulteten för medicinsk vetenskap, Naresuan University och Avdelningen för forskningsadministration, Naresuan University, för att stödja och lura publikationskostnaden.