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Tiempo de retención y tiempo muerto

La mayoría de las técnicas de separación consisten en una columna cromatográfica, fase estacionaria y fase móvil, y utilizan terminología común. Por lo tanto, es mejor aprender algunos descritos en el libro de texto para HPLC (Ref.1) a modo de resumen:

El tiempo de retención A t_\mathrm{R} sol soluto A puede definirse como el tiempo desde la inyección de la muestra hasta el tiempo de elución del compuesto, tomado en el máximo (vértice) del pico que pertenece a la especie molecular específica A (conocida o desconocida). El tiempo de retención indica el tiempo que tarda un compuesto A en filtrarse de la columna (del inyector al detector). El tiempo de retención del último pico (si la muestra contiene varios compuestos) en un cromatograma se utiliza para estimar la longitud necesaria del recorrido cromatográfico. En general, para una especie molecular A, el tiempo de retención se puede indicar como $t_\mathrm{R} A(A) y el tiempo se mide generalmente en $\pu{min}.. Sin embargo, la parte «(A)» en la notación a veces se omite, sin embargo $t_\mathrm{R} always siempre está relacionada con una especie molecular específica.

El tiempo de retención depende no solo de la estructura de la molécula específica, sino también de factores como la naturaleza de las fases móvil y estacionaria, el caudal de la fase móvil y las dimensiones de la columna cromatográfica. El tiempo de retención suele ser característico de un compuesto específico en una separación dada. Por esta razón, el tiempo de retención es crítico para identificar analitos una vez que se conoce su tiempo de retención (por ejemplo, mediante el uso de estándares).

De particular interés en una separación es el tiempo muerto t t_ \ mathrm{M}$, que es el tiempo que una especie molecular no retenida necesita eluir de la columna cromatográfica. El tiempo muerto también se conoce como tiempo vacío o tiempo de atraco. El tiempo muerto t t_\mathrm{M} can también se puede interpretar como parte del tiempo de retención t t_\mathrm{R} A(A) para el analito A, que el analito pasa en la fase móvil moviéndose a través de la columna (Esa es la razón de la subscripción «M» que significa móvil). Este parámetro no está relacionado con el proceso de retención y depende del caudal y las características físicas de la columna (es decir, longitud, diámetro, porosidad de la fase estacionaria). La diferencia entre el tiempo de retención ($t_\mathrm{R}$) y el tiempo muerto ($t_\mathrm{M}$) representa el momento en que el analito es Un retenidos en la fase estacionaria ($t_\mathrm{S}$). Esta diferencia se indica como tiempo de retención reducido t t_\mathrm{S} {(o t t ‘ _\mathrm{R} R) y se expresa mediante la fórmula:$$t_\mathrm{S}=t_\mathrm{R}-t_\mathrm{M}$$

El valor de $t_\mathrm{M}$ es normalmente se obtiene como una aproximación mediante el uso de compuestos que son muy poco conservado, ya que puede ser difícil encontrar un compuesto que no es retenido en una columna cromatográfica. Por ejemplo, durante los ciclos de HPLC, el disolvente utilizado para inyectar la muestra (cuando es diferente de la fase móvil) puede ser un compuesto de este tipo, y el tiempo de retención de este pico de disolvente puede tomarse como tiempo muerto.

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