morfologia și rata de dezvoltare a zbura lovitură, Hemipyrellia ligurriens( Diptera: Calliphoridae): Aplicații Entomologie medico-legale
rezumat
Hemipyrellia ligurriens (Diptera: Calliphoridae) este o specie de muște lovitură de importanță criminalistică prezentate în multe țări. În acest studiu, am determinat morfologia tuturor etapelor și rata de dezvoltare a H. ligurriens crescute în condiții ambientale naturale în provincia Phitsanulok, nordul Thailandei. Caracteristicile morfologice ale tuturor etapelor bazate pe observarea la microscopul luminos au fost descrise și demonstrate pentru a fi utilizate în scop de identificare. Mai mult, a fost dat timp de dezvoltare în fiecare etapă. Timpul de dezvoltare al lui H. ligurriens pentru a finaliza metamorfoza; de la ou, larvă, pupa la adult, a luat 270,71 h pentru 1 ciclu de dezvoltare. Rezultatele acestui studiu pot fi utile nu numai pentru aplicarea în investigarea criminalistică, ci și pentru studiul biologiei sale în viitor.
1. Introducere
specimene de muște (Diptera: Calliphoridae), în special larvele de muște găsite în cadavre și/sau la locul morții, pot fi utilizate ca dovezi entomologice în investigațiile medico-legale, adică estimarea intervalului postmortem (PMI) și determinarea substanțelor toxice, a traumei antemortem și dacă a avut loc relocarea rămășițelor, așa cum s-a documentat deja . Identificarea morfologică precisă a specimenelor de insecte este unul dintre factorii foarte importanți din punct de vedere aplicat, deoarece oferă dovezi relevante pentru investigațiile medico-legale . din speciile de muște, Hemipyrellia ligurriens (Wiedemann) este o specie de muște importantă din punct de vedere criminalistic, așa cum s-a raportat anterior din cazurile din Thailanda și Malaezia . Această specie de muște este distribuită pe scară largă, acoperind Coreea, Taiwan, Laos, Singapore, Papua Noua Guinee, Australia, India, China, Filipine, Sri Lanka, Malaezia, Indonezia și Thailanda . Pe lângă importanța sa criminalistică, H. ligurriens poate fi o pacoste în piețe și grădini, iar adulții sunt, de asemenea, vectori mecanici ai agenților patogeni, datorită atracției lor către excrementele umane din apropierea mediilor ocupate de oameni . Anterior, morfologia unor stadii imature (ou, larve 3-instar și puparium) de H. ligurriens a fost studiată numai prin observarea sub un microscop electronic de scanare și un microscop cu lumină . Din acest motiv, informațiile disponibile despre H. ligurriens sunt incomplete pentru identificarea tuturor dovezilor imature care pot fi găsite în scenele morții. În plus, rata de dezvoltare a acestei specii, care reprezintă date importante pentru estimarea ASP, nu a fost găsită în literatura citată. Mai mult, datele de dezvoltare specifice populației locale sunt foarte importante pentru estimarea vârstei larvare pentru a determina PMI . Pentru a crește acuratețea și precizia la aplicarea acestor informații în investigațiile medico-legale, studiul tuturor etapelor sale imature și a ratei de dezvoltare este de mare interes, deoarece morfologia fiecăruia ar putea oferi caracteristici specifice care vor deveni importante pentru o identificare adecvată, iar datele de creștere în special condiție ar putea furniza date esențiale pentru estimarea PMI. Prin urmare, acest studiu a urmărit să investigheze caracteristicile distinctive ale tuturor etapelor sale imature prin observarea sub microscopul luminos, pentru a oferi câteva detalii importante pentru identificare și pentru a determina rata sa de dezvoltare, în special în stare în provincia Phitsanulok, nordul Thailandei.
2. Materiale și metode
2.1. Menținerea H. ligurriens în laborator
Colonia H. ligurriens utilizate în acest studiu a fost obținut inițial prin colectarea muștelor adulte cu o plasă de măturat în zonele din satul Sao Hin, Districtul Muang Phitsanulok, Provincia Phitsanulok, Thailanda (16 44 ’18N; 100 13′ 44E). Toți adulții din H. ligurriens au fost colectați pe teren și identificați pe baza morfologiei lor, folosind cheia taxonomică a lui Tumrasvin și colab. , înainte de a fi crescut mai departe în laborator. Muștele au fost crescute în condiții ambientale naturale în camera de creștere a sistemului deschis, conform metodei lui Sukontason și colab. . Pe scurt, adulții au fost menținuți într-o cușcă de creștere (30 de la 30 la 30 la 30 cm) și hrăniți cu 2 tipuri de alimente: (i) un amestec de 10% (m/v) soluție de zahăr și 1,5% (v/v) soluție de sirop multivitaminic (SEVEN SEA, Anglia) și (ii) ficat de porc proaspăt. Ficatul de porc proaspăt a fost furnizat ca hrană larvară și loc de ovipoziție. Prezența ouălor pe ficatul de porc a fost observată zilnic. Când s-au găsit ouă, ficatul de porc cu ouă de muscă a fost transferat ușor într-o cutie de creștere a larvelor cu ajutorul forcepsului și apoi, 2 sau 3 bucăți (50 g/zi) de ficat de porc proaspăt au fost adăugate în cutie ca hrană pentru larve. Unele bucăți de ficat de porc proaspăt au fost adăugate zilnic până când larvele din cutie au încetat să se hrănească și să se miște sau au devenit stadiul prepupal (târziu al 3-lea instar). Toate bucățile de ficat de porc care au rămas în cutia de creștere au fost scoase din cutie. Numai pupae au fost ținute în cutia de creștere și sigilate strâns până la apariția adultului a fost găsit. După aceea, cutia a fost plasată și deschisă într-o cușcă de creștere pentru a elibera adulții din cutie pentru a trăi în cușca de creștere. Noua generație de muște a fost crescută continuu, așa cum s-a menționat mai sus.
2.2. Morfologie
ou
în acest studiu, probele de ouă de H. ligurriens au fost obținute din colonia de laborator pentru a investiga caracteristicile distincte prin utilizarea tehnicii de colorare a permanganatului de potasiu, conform descrierii anterioare a Sukontason și colab. . Principalele caracteristici, cum ar fi morfologia zonei mediane din jurul micropilului și sculptura corionică, au fost observate și fotografiate la microscopul luminos (Olympus, Japonia), care a fost conectat la o cameră digitală (Samsung S700, Coreea). Mai mult, lățimile și lungimile a 30 de ouă de muște au fost, de asemenea, măsurate la microscopul cu lumină calibrată. Deviația medie și standard a lățimii și lungimii au fost analizate utilizând programul Excel (Microsoft office Enterprise 2007).
Larva
acest studiu a determinat morfologia și rata de dezvoltare în toate stadiile larvare (1, 2 și 3). Morfologia tuturor instarilor a fost investigată prin metoda de compensare a hidroxidului. Pe scurt, 30 de larve din fiecare instar au fost obținute din colonia de laborator și sacrificate prin plasarea lor într-un pahar care conține apă fierbinte (80 C) timp de 30 sec pentru a preveni micșorarea lor . După aceea, au fost păstrate într-o sticlă mică de sticlă care conține 70% etanol. Larvele conservate au fost disecate individual în două locuri pentru a obține trei porțiuni ale corpului folosind o lamă ascuțită sub microscop stereo (Olympus, Japonia), conform metodei descrise de Sukontason și colab. . Prima tăietură a fost poziționată în mijlocul celui de-al doilea segment toracic pentru vizualizarea scheletului cefalofaringian intern și a spiracolului anterior extern. A doua tăietură a fost poziționată pe segmentul 11 al corpului pentru a observa caracteristicile spiracolului posterior. Ca metodă de curățare, fiecare pereche de părți anterioare și posterioare a fost lăsată într-o placă de sticlă conținând 10% (g/v) soluție de hidroxid de potasiu timp de 1 zi (pentru 1 instar) sau 2 zile (pentru 2 și 3 instar). Ulterior, exemplarele au fost spălate de două ori cu apă distilată și neutralizate prin plasarea lor pe o placă de sticlă care conține un amestec de 35% etanol și 1% acid acetic glacial timp de 30 min. După aceea, exemplarele au fost deshidratate în serie în 50%, 70%, 80%, 95%, și etanol absolut (RCI LABSCAN, Thailanda) pentru 30 min pe concentrație de alcool. Probele deshidratate au fost transferate pe o placă de sticlă care conține xilen (PROLAB, Franța) și lăsate timp de 1 min înainte de montarea pe o lamelă de sticlă cu 2-3 picături de mediu de montare (Permount). O alunecare de acoperire a fost plasată peste fiecare specimen. Diapozitivele permanente au fost lăsate la temperatura camerei timp de 2 zile înainte de a fi observate la microscopul luminos. Scheletul cefalofaringian și spiracul posterior al fiecărui instar au fost fotografiate sub microscopul luminos, care a fost conectat la camera digitală. În plus, au fost examinate lungimea și lățimea corpului tuturor instarelor. Treizeci din larvele primului instar au fost măsurate folosind un microscop calibrat, în timp ce al doilea și al treilea instar (n = 30 larve/ fiecare instar) au fost măsurate cu etriere vernier sub un microscop disecant. Deviația medie și standard a lățimii și lungimii corpului lor au fost analizate utilizând programul Excel.
Pupa
în această etapă au fost studiate morfologia părților anterioare și posterioare și modificarea colorației. Părțile anterioare și posterioare ale pupariei au fost determinate prin utilizarea tehnicii de curățare a hidroxidului de potasiu, descrisă anterior de Sukontason și colab. . Părțile anterioare ale pupariei au fost rămășițele capului contractat până la al patrulea segment al pupariei după apariția muștelor. Au fost recrutați din cutia de creștere care a apărut deja. Pentru fiecare parte posterioară, segmentul caudal de pupariu a fost tăiat cu o lamă ascuțită sub microscop stereo și apoi transferat prin utilizarea forcepsului în aceeași placă de sticlă ca cea utilizată pentru partea anterioară. După aceea, au fost înmuiate în 1% (v/v) detergent pentru spălarea vaselor pentru a îndepărta Artefactele de suprafață și/sau țesuturile ficatului de porc. Ca metodă de curățare, părțile anterioare și posterioare au fost lăsate într-o eprubetă care conține soluție de hidroxid de potasiu de 10% (G/v), iar eprubeta a fost transferată într-o baie de apă setată la o temperatură de 80 CTC timp de 1 oră. Apoi, procesul de specimen a fost efectuat după cel descris pentru stadiul larvei. Caracteristicile importante ale părților anterioare și posterioare au fost observate și fotografiate sub microscopul luminos, conectat la camera digitală. Numărul de papile în fiecare spiracle posterior de 30 de părți anterioare a fost numărat și calculat pentru gama sa. În plus, treizeci de pupari au fost măsurați pentru lățimea și lungimea lor folosind etriere vernier. Abaterea medie și standard a lățimii și lungimii lor au fost analizate utilizând programul Excel. Pentru observarea schimbării culorii, a fost selectat și fotografiat un singur pupariu care a reprezentat culoarea pupariei în cutia de creștere 0, 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, și 24 h prin utilizarea camerei digitale. Înainte de a face fotografii, puparium a fost spălat în apă distilată pentru a îndepărta Artefactele de suprafață.
Adult
adulții tineri, de 5-7 zile, au fost obținuți din creșterea în cuști folosind o eprubetă. Ei au fost sacrificați prin plasarea lor într-un frigider (-4 C) pentru 2 h. după aceea, au fost ușor fixați cu un aranjament anatomic bun. Caracteristicile importante pentru identificare au fost examinate și fotografiate sub microscopul stereo, conectat la camera digitală. În plus, treizeci de adulți au fost măsurați pentru lățimea și lungimea corpului folosind etriere vernier. În acest studiu, lățimea corpului înseamnă lățimea segmentului toracic 2, iar lungimea corpului este întreaga lungime a corpului, variind de la ochiul compus din mijloc până la ultimul segment al abdomenului. Deviația medie și standard a lățimii și lungimii corpului lor au fost analizate utilizând programul Excel.
2.3. Evaluarea ratei de dezvoltare
pentru evaluarea ratei de dezvoltare, experimentele au fost efectuate în camera de creștere în sistem deschis sub temperatura ambiantă naturală a provinciei Phitsanulok, nordul Thailandei. Temperatura și umiditatea relativă au fost înregistrate zilnic cu ajutorul unui termometru și higrometru (Thermo-Hygro TM870, China). Intervalele de temperatură și umiditate relativă înregistrate, utilizate pentru determinarea ratei de dezvoltare a acestei muște, au fost de 26,7 0,61 0,61 0,6%, respectiv 74 3%. Pentru fiecare experiment, rata de dezvoltare a început la găsirea larvelor nou eclozate (sau a instarului 1); stadiul prepupal a însemnat punctul final. Larvele nou eclozate au fost recunoscute ca larve vechi de 0 ore. Evaluarea ratei de dezvoltare în acest studiu a fost studiată prin separarea larvelor nou eclozate de aceeași colonie de muște adulte în 3 grupe. Fiecare grup a constat din 150-200 de larve nou eclozate. Acestea au fost transferate ușor din cutia de creștere în cea nouă folosind o perie de vopsea umedă (numărul 4). Ficatul de porc proaspăt (50 g) a fost furnizat zilnic ca sursă de hrană pentru larve în fiecare cutie de creștere. Cele mai mari cinci larve au fost scoase din cutia de creștere la fiecare 3 ore. acestea au fost sacrificate prin introducerea în apă fierbinte (80 xtct) timp de 30 de secunde pentru a preveni contracția larvelor și au fost păstrate într-o sticlă mică de sticlă care conține 70% etanol. Toate larvele conservate au fost măsurate lungimi ale corpului folosind un microscop calibrat sau etriere vernier sub un microscop disecant, în funcție de dimensiunile lor. Relația dintre lungimile corpului larvar și timpul de dezvoltare a fost analizată folosind programul Excel. În plus, durata de viață în alte etape a fost înregistrată și analizată utilizând programul Excel.
3. Rezultate
3.1. Morfologie
ou
oul de H. ligurriens a fost alungit și conic atât la capetele anterioare, cât și la cele posterioare (Figura 1(a)). A măsurat 1,44 0,11 mm în lungime și 0,47 0,04 mm în lățime (Tabelul 1). A fost nevoie de timp în această etapă pentru 10,3 0,30 ore de la 0,30 ore înainte de năpârlire pentru a fi stadiul larvelor (Tabelul 1). Oul nepătat era alb crem; în timp ce cele după colorarea cu permanganat de potasiu 1% erau de culoare maro deschis. Zona mediană a fost localizată dorsal, poziționând o formă Y care se extindea de la capătul anterior până aproape la capătul posterior (Figura 1(b)). Linia de eclozare a fost verticală, afișând astfel o îngroșare întunecată de-a lungul zonei mediane (Figura 1(a)). Sculptura corionică a apărut ca un model hexagonal, cu limita reticulară ușor ridicată ca o plasă (Figura 1(c)).
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Larva
sub observație cu microscopul stereo, toate instarele larvare ale H. ligurriens au prezentat o larvă vermiformă tipică în formă de muscoid care a fost îndreptată în față și contondentă în posterior. Segmentul caudal avea o singură pereche de spirale posterioare. Prima etapă a fost relativ mică, măsurând 2,62 0,70 mm în lungime și 0,75 0,35 mm în lățime, timpul de dezvoltare în această etapă fiind de 12 0,1 ore în 0,1 (Tabelul 1). Scheletul cefalofaringian nu a fost bine dezvoltat(Figura 2 (A)), în timp ce spiracolul posterior a avut 2 fante spiraculare care fuzionează ventral(Figura 2 (e)). Cea de-a doua treaptă a fost de 6,24 XTX 1,67 mm lungime și 1,37 XTX 0,19 mm lățime, cu o durată de 12 XTX 3 h în această etapă (Tabelul 1). Scheletul cefalofaringian a fost aproape complet (figura 2 (b)), în timp ce spiracolul posterior a avut 2 fante spiraculare separate cu peritrem incomplet slab pigmentat(Figura 2 (f)). Dimensiunea celui de-al 3-lea instar a fost cea mai mare, măsurând 12,18 int.1,31 mm în lungime și 2,32 int. 0,19 mm în lățime. Timpul de dezvoltare a fost, de asemenea, cel mai lung în această etapă, fiind de 84 de ore de 3 ore (Tabelul 1). Scheletele cefalofaringiene ale instarului 3 timpuriu și târziu au fost similare (figurile 2(c) și 2(d), resp.). Spiracolele posterioare ale instarului timpuriu (Figura 2(g)) și ale celui de-al 3-lea instar târziu (Figura 2(h)) au fost similare, având 3 fante spiraculare separate și peritreme complete cu o proiecție interslită, cu excepția celor din urmă care prezintă un peritrem foarte pigmentat (Figura 2(h)). Caracteristicile distinctive ale tuturor celor trei instari au fost rezumate în tabelul 2.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Schelete Cefalofaringiene și spiracole posterioare ale larvelor Hemipyrellia ligurriens. Schelete cefalofaringiene de (a) instar 1, (b) instar 2, (c) instar 3 timpuriu,. și (d) târziu a 3-a instar. Spirale posterioare ale (e) instarului 1, (f) instarului 2, (g) instarului 3 timpuriu și (h) instarului 3 târziu. Bare = 100 m pentru toate cifrele.
Pupa
puparia lui H. ligurriens a fost de formă tipică de coarctat (Figura 3), care a măsurat 6,82 0.27 mm lungime și 2,76 0,11 mm lățime (Tabelul 1). Modificările de culoare observate au arătat că pupariul timpuriu a fost de culoare alb-crem (0 h), cu capătul posterior încă trunchiat (Figura 3(a)). Cu toate acestea, culoarea pupariumului s-a schimbat treptat în maro galben deschis în decurs de 3 ore după pupariație [Figura 3 (b)] și apoi în maro după aproximativ 15 ore [Figura 3(f)]. Culoarea pupariului s-a schimbat în maro închis după aproximativ 18 ore de observație (Figura 3(g)). La 24 de ore, pupariul a arătat cea mai întunecată culoare maro (Figura 3(i)). Durata pentru întreaga etapă pupală a fost de 152,5 x,30,7 ore (Tabelul 1).
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
(i)
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
(i)
Color changes in puparia of Hemipyrellia ligurriens up to 24 h after pupariation. Puparium (a)–(i) at 0, 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, and 24 h, respectively. Bars = 100 𝜇m for all figures.
observarea părților anterioare și posterioare ale pupariei a apărut ca o culoare galben-maro pal după ce a fost tratată cu hidroxid de potasiu 10%. Placa anterioară, presată cu o alunecare de acoperire, avea formă trapezoidală cu 2 spirale anterioare situate la ambele capete superioare (Figura 4(a)). Fiecare spiracle anterioară a constat din 5 până la 7 papile (Figura 4(b)). Coloana vertebrală observată în cel de-al treilea segment a afișat rânduri de vârfuri cu un singur vârf (Figura 4(c)). Fiecare spiracle posterior a apărut trei fante spiraculare maro închis foarte pigmentate, cu buton foarte pigmentat și peritrem slab pigmentat (Figura 4(d)).
(a)
(b)
(c)
(d)
(a)
(b)
(c)
(d)
Puparium of Hemipyrellia ligurriens after treating with 10% KOH. (a) Anterior plate with trapezoid shape. (b) Anterior spiracle with 6 papillae. (c) Modelul coloanei vertebrale la al 3-lea segment care prezintă vârful unui singur punct. (d) spirale posterioare. Bare = 100 m pentru toate cifrele.
Adult
adultul H. ligurriens avea o lungime de 12,23 0,61 mm, o lățime de 2,85 0,25 mm (Tabelul 1) și un aspect de culoare verde cupru metalic, cu polinoză albă cenușie pe partea anterioară a toracelui (figurile 5(a) și 5(b)). Capul femelei era dihoptic, dar cel al masculului era subholoptic (figurile 5(c) și 5(d)). Polinozitatea facială cenușie a fost găsită la ambele sexe (figurile 5(c) și 5(d)), iar întregul al treilea segment antennal a fost maro închis sau portocaliu ventral (figurile 5(c) și 5(d)). Squama era albicioasă(Figura 5 (e)). Gena era acoperită cu fire de păr negre (Figura 5(f)). Vena Stem a fost fără setule(Figura 5 (g)). Două seturi acrostichale postsuturale au fost găsite pe torace (Figura 5(h)). Supraconvexitatea a fost găsită părul pilos (Figura 5 (i)). Toate caracteristicile de mai sus au fost importante pentru identificarea acestui ADULT.
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
(i)
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
(i)
Adults and important characteristics for identification of Hemipyrellialigurrien. (a) Dorsal view of the female. (b) Dorsal view of the male. (c) Frons of the female showing dichoptic eyes. (d) Frons of the male showing subholoptic eyes. (e) vedere laterală a adultului care prezintă squamae albicioase (săgeată). (f) mărire mai mare a capului care prezintă fire de păr negre pe gena (săgeată). (g) aripa care prezintă vena stem fără setule (săgeată). (h) toracele dorsale. (i) părul pilos pe supraconvexitate (săgeată). Bare = 200 m pentru toate cifrele.
3.2. Evaluarea ratei de dezvoltare
evaluările ratei de dezvoltare a H. ligurriens au fost determinate în timpul perioadei de anchetă, pe baza stării ambientale naturale a provinciei Phitsanulok. Curba de creștere a stadiului larvar a prezentat forma sigmoidă (Figura 6). Datele privind rata de dezvoltare a creșterii au arătat că timpul de dezvoltare de la larvele nou eclozate până la începutul pupariației crește rapid într-o perioadă totală de 108 ore. larvele au atins lungimea mediană maximă la 42 ore de la sută, iar pupariația a avut loc la 108 ore. durata de viață a tuturor etapelor a fost, de asemenea, rezumată în tabelul 1.
4. Discuție
datele referitoare la caracteristicile importante ale insectelor pentru identificarea și dezvoltarea rapidă și fiabilă în laborator sunt premise esențiale pentru aplicarea adecvată în investigațiile medico-legale. H. ligurriens este o specie de muște de lovitură importantă din punct de vedere criminalistic, care a fost înregistrată în cazurile medico-legale din Malaezia și Thailanda . Acest studiu s-a axat pe caracteristicile importante pentru identificarea tuturor etapelor H. ligurriens, pe baza observării la microscopul luminos și a timpului de dezvoltare a fiecărei etape în condiții ambientale naturale cu temperaturi medii și umiditate relativă, care au fost de 26,7 0,61 0,61 0,6%, respectiv 74 3%. Deși morfologia în unele etape ale H. ligurriens a fost studiată anterior folosind microscopul electronic de scanare și microscopul luminos, acest studiu a furnizat informații mai detaliate despre trăsăturile distinctive și noi indicii pentru identificare prin utilizarea unor tehnici simple pentru a crește acuratețea și precizia aplicării medico-legale în viitor. Mai mult, acest studiu a furnizat date de dezvoltare ale lui H. ligurriens, care pot fi utilizate în estimarea PMI a cadavrelor pe care această specie de muște a colonizat.
sculptura corionică, precum și lățimea și lungimea zonei mediane au fost raportate anterior ca o caracteristică importantă în identificarea oului de muscă . Morfologia oului H. ligurriens, observată în acest studiu prin colorarea cu permanganat de potasiu 1% și observarea sub microscopul luminos, a fost similară cu cea din lucrarea anterioară, care a investigat prin utilizarea microscopului electronic de scanare . Prin urmare, rezultatele acestui studiu au confirmat eficacitatea metodei de colorare, inițiată de Sukontason și colab. , în scopul identificării ouălor de muște. Ouăle colorate puteau fi observate clar la microscopul luminos. La compararea datelor cu studiile anterioare, mărimea oului H. ligurriens în acest studiu a fost mai mare decât cea a altor muște, cum ar fi Lucilia cuprina, Ceylonomyia (= Chrysomya) nigripes și Aldrichina grahami; cu toate acestea, dimensiunea sa nu a fost diferită de dimensiunile Chrysomya megacephala și achoetandrus (= Chrysomya) rufifacies . Cu toate acestea, mărimea ouălor de muște nu poate fi utilizată ca caracteristici principale pentru identificare , potrivit informațiilor furnizate de Erzinclioglu, care a raportat că mărimea ouălor de muște depinde de nivelurile alimentare. Prin urmare, identificarea oului de muscă ar trebui să utilizeze caracteristicile lățimii plastronului, morfologia zonei plastronului care înconjoară micropilul ca criterii principale și să utilizeze dimensiunea ca caracteristică suplimentară pentru identificarea ouălor .
pe baza referințelor noastre, acest studiu a fost primul studiu, prezentând morfologia scheletului cefalofaringian și a spiracolului posterior la toate larvele instare prin observarea sub microscopul luminos. Scheletele cefalofaringiene și spiracolele posterioare ale larvelor au fost văzute clar ca fiind diferite în fiecare instar. Rezultatele acestui studiu au fost de acord cu rapoartele anterioare . În plus, acest studiu a arătat gradul de pigmentare a peritremului în fiecare stadiu. Poate fi un nou indiciu pentru diferențierea vârstei larvelor, în special între instarul timpuriu și cel târziu. Având în vedere că fiecare stadiu de dezvoltare este cu siguranță diferit, precum și gradul de pigmentare, datele din acest studiu pot fi utile în identificarea stadiilor larvare și a vârstei larvelor acestei muște, așa cum s-a menționat mai sus.
studiul morfologic al stadiului pupal a furnizat rezultate similare cu rapoartele anterioare . Rezultatele observării modificărilor colorației în funcție de timp ale H. ligurriens puparia au fost raportate pentru prima dată în acest studiu și pot fi o altă dovadă nouă de susținere pentru a determina cel puțin vârsta aproximativă a puparia pentru creșterea preciziei valorii PMI.
acest studiu a demonstrat câteva fotografii ale trăsăturilor distinctive pentru utilizarea în identificarea adulților H. ligurriens. Aceste fotografii cu caracteristici specifice din acest studiu pot fi utile pentru persoanele care nu sunt familiarizate cu terminologia din cheile taxonomice. Cheia taxonomică actuală pentru identificarea speciilor de muște în Thailanda a fost dată de Kurahashi și Bunchu . Prin ochii goi ai unui nonentomolog, adultul H. ligurriens pare similar cu A. rufifacies în aparență. Prin urmare, șansa de identificare greșită poate apărea la ambele specii, în special în Thailanda, deoarece A. rufifacies a fost a doua cea mai predominantă specie de muște din Thailanda și s-a găsit coincidența ambelor specii în unele provincii din această țară .
acest studiu a fost primul raport care a furnizat timpul de dezvoltare al H. ligurriens în toate etapele. Rezultatele au arătat că timpul de dezvoltare a H. ligurriens în condiții naturale în acest studiu (o temperatură medie de 26,7 0,61 0,61 0,6% și o umiditate relativă de 74 3%) a fost mai rapid decât cel al C. megacephala și A. rufifacies, care au fost studiate la o temperatură medie de 27,4 c . Mai mult, timpul de dezvoltare al fiecărei etape a lui H. ligurriens a fost diferit de cel al lui C. megacephala și A. rufifacies. Rata de dezvoltare a fiecărei specii a fost specificată, deși au crescut în aceleași condiții sau în condiții conexe . Mai mult, variația timpilor de dezvoltare în cadrul unei specii de muște a fost găsită în populații diferite din punct de vedere geografic . Datele de dezvoltare specifice populației locale sunt necesare pentru estimarea vârstei larvare pentru a determina PMI. Prin urmare, datele din acest studiu sunt foarte importante pentru aplicarea ulterioară, în special în provincia Phitsanulok.
datele obținute atât din caracteristicile morfologice, cât și din timpul de dezvoltare, îndeplinesc informațiile anterioare și oferă noi dovezi de susținere pentru identificarea acestei specii de muște și aplicarea în investigația medico-legală, în special atunci când H. ligurriens este prezent în cadavrele umane. Mai mult, ele pot fi utile ca date de bază în studiul său de biologie în viitor.
mulțumiri
acest studiu a fost susținut în principal de un grant acordat N. Bunchu de la Facultatea de științe Medicale, Universitatea Naresuan și altul de la Fondul de cercetare din Thailanda (MRG5280194). Autorii mulțumesc, de asemenea, Centrului de Excelență în biotehnologie medicală, Facultății de științe Medicale, Universității Naresuan și Diviziei de administrare a cercetării, Universității Naresuan, pentru sprijin și suportarea costului publicării.