un anticorp policlonal este o colecție de multeimunoglobuline, fiecare generată dintr-o clonă diferită de celule B. Acești anticorpi vizează diferiți epitopi sau situsuri de legare pe un singur antigen. Derivarea din mai multe clone de celule B și direcționarea ulterioară a mai multor epitopi este ceea ce diferențiază anticorpii policlonali de anticorpii monoclonali.

cum se fac anticorpi policlonali

toate generările de anticorpi, policlonali sau monoclonali, încep cu provocarea unui răspuns imun, denumit imunizare. Țintele intenționate sunt injectate în gazdă, recunoscute de sistemul imunitar ca străine și vizate de anticorpi pentru blocarea sau eliminarea imunității. Eșecul de a monta un răspuns imun ar necesita utilizarea de adjuvanți, substanțe imunogene, cum ar fi adjuvantul Freund sau hemocianina limpet keyhole (KLH), pentru a conduce în continuare recrutarea imună. Imunizarea cuprinde majoritatea a ceea ce este necesar pentru a produce anticorpi policlonali. Un răspuns imun tipic este prezentat mai jos.

producerea anticorpilor începe cu imunizarea

expunerea inițială pentru răspunsul imun primar

expunerea inițială a gazdei la antigen cu adjuvanți adecvați, expunerea este denumită imunizare „prim”. Metodele tipice de expunere includ injectarea în piele, peritoneu, strat subcutanat sau mușchi. Alternative mai puțin frecvente sunt administrarea orală și intranazală.Imunizarea ADN este, de asemenea, o tehnologie emergentă pentru antigeni toxici sau altfel dificil de produs. Orice expunere ulterioară la antigen este denumită imunizare „boost”.

prelucrarea antigenului prin celule prezentatoare de Antigen

macrofage, celule dendritice (DC) și, într-o măsură mai mică, celule B, toate celulele prezentatoare de antigen (APC), internalizează antigenul prin endocitoză sau fagocitoză. Prelucrarea antigenului sparge antigenul în bucăți mai mici, care sunt apoi mutate pe suprafața APC.

stimularea celulelor B

recunoașterea antigenului prezentat pe suprafața APC induce eliberarea moleculelor de semnalizare stimulatoare, citokine, din celulele T Helper. Aceste citokine activează celulele B care au recunoscut și antigenul prin receptorul lor de celule B (BCR). Unele celule B nu necesită activarea celulelor T ajutătoare după interacțiunea antigenului BCR, producând de obicei un răspuns imun mai rapid cu anticorpi cu afinitate mai mică. Implicarea celulelor T Helper este critică într-un răspuns imun plin, precum și în reglarea auto-toleranței.

proliferarea celulelor B și secreția de anticorpi

celulele B activate se divid pentru a crea atât populațiile de celule B de memorie, cât și cele de celule plasmatice. Ambele tipuri de celule recunosc același epitop. Celulele plasmatice secretă anticorpi în ser pentru recunoașterea imună, în timp ce celulele B de memorie persistă pentru perioade mai lungi, oferind un răspuns rapid la expunerea secundară a aceluiași antigen.

măsurarea răspunsului imun

măsurarea nivelurilor de anticorpi în timpul procesului de imunizare este necesară pentru a evalua progresul. Anelisa împotriva antigenului țintă compară probele serice imunizate cu probele serice preimunizate care dezvăluie gradul de răspuns imun determinat de imunizare. Diluțiile seriale ale probelor determină titrul anticorpului. De obicei a 1:64000 titru este considerat un răspuns imun robust și suficient pentru a continua recoltarea serică sau fuziunea limfocitelor. Titrurile mai mici pot necesita imunizări ulterioare, căi alternative de administrare sau adjuvanți suplimentari.

recoltarea serică a anticorpilor policlonali

producția de anticorpi policlonali necesită doar recuperarea sângelui de la animalul gazdă și separarea fracțiunii celulare de fracțiunea serică care conține anticorpi secretați. Deoarece mulți anticorpi specifici antigenului sunt secretați de mai multe celule B activate, serul de sânge conține numeroasele produse ale diferitelor clone de anticorpi, de unde și termenul anticorp policlonal. Mai exact, crearea mai multor anticorpi clonali împotriva unui antigen se realizează atât prin prelucrarea antigenului în fragmente, cât și prin fiecare fragment având regiuni mai mici, denumite epitopi. Fiecare poate fi recunoscut de BCR-uri specifice. Populațiile distincte de celule B secretă anticorpi specifici, dar diferiți împotriva aceluiași antigen. Mai mult, serul conține nu numai anticorpi direcționați împotriva antigenului țintă dorit, ci și toate celelalte imunoglobuline împotriva altor ținte, medicamente, hormoni etc. care sunt în ser. Serul poate fi utilizat direct ca sondă de biologie moleculară, dar necesită adesea o purificare suplimentară pentru a crește sensibilitatea și specificitatea unui anumit test. Purificarea prin afinitate realizează recuperarea anticorpilor în grade diferite, în funcție de tehnică, așa cum se arată mai jos, cu toate acestea, niciuna nu atinge specificitatea nivelului epitop al unui anticorp monoclonal.

Polyclonal Antibody Applications

servicii legate de anticorpii policlonali

serviciul ourpolyexpress-ul este un mod eficient și rapid de a face sonde moleculare personalizate. De la secvența antigenului la anticorpii livrați în 45 de zile garantate. Căutați și mai mult control al dezvoltării anticorpilor? Uitați-vă la unele dintre celelalte servicii ale noastre de anticorpi:

• imunizări ADN, specialitatea noastră. Pentru începerea oricărui proiect de dezvoltare a anticorpilor. Eludează producția de antigen proteic in vitro și se ocupă de ținte dificile.
• MonoExpress serviciul de servicii de anticorpi de la Olt poartă garanții de aplicare de vârf în industrie,asigurând succesul în testele dvs.
• anticorpii Anti-idiotip fac testarea PK sau PD a medicamentelor cu anticorpi terapeutici ușoară. Ei detectează doar CDR-ul anticorpului țintă.

cu 12 ani de experiență în dezvoltarea de anticorpi personalizați, proiectul dvs. este în mâinile experților. Obțineți o ofertă astăzi!

cotațiile și comanda

reprezentanții noștri de servicii pentru clienți sunt disponibili 24 de ore pe zi, de luni până vineri, pentru a vă ajuta.