a maioria das técnicas de separação consistem numa coluna cromatográfica, fase estacionária e fase móvel, e utilizam terminologia comum. Portanto, é melhor aprender alguns descritos no livro de texto para HPLC (Ref.1) como uma visão geral:

O tempo de retenção $t_\mathrm{R}$ soluto pode ser definido como o tempo entre a injeção da amostra para o tempo de eluição de compostos, no máximo (apex) do pico, que pertence ao específicas molecular de espécies de Um (conhecido ou desconhecido). O tempo de retenção indica quanto tempo leva para um composto a eluir da coluna (do injector ao detector). Utiliza-se o tempo de retenção do último pico (se a amostra contiver compostos múltiplos) num cromatograma para estimar o comprimento necessário da operação cromatográfica. Em geral, para uma espécie molecular A, o tempo de retenção pode ser indicado como $t_\mathrm{R}$(A) e o tempo é normalmente medido em $\pu{min}$. No entanto, a parte “(a)” na notação é às vezes omitida, ainda que $t_\mathrm{R}$ é sempre relacionada a uma espécie molecular específica.

O tempo de retenção depende não só da estrutura da molécula específica, mas também de factores como a natureza das fases móvel e estacionária, o caudal da fase móvel e as dimensões da coluna cromatográfica. O tempo de retenção é geralmente característico para um composto específico em uma determinada separação. Por esta razão, o tempo de retenção é fundamental na identificação de analitos uma vez que o seu tempo de retenção é conhecido (por exemplo, usando padrões).

de particular interesse em uma separação é o tempo morto $t_\mathrm{m}$, que é o tempo que uma espécie molecular não mantida precisa para eluir a partir da coluna cromatográfica. O tempo morto também é conhecido como tempo vazio ou tempo de assalto. O tempo morto $t_\mathrm{M}$, também pode ser interpretado como parte do tempo de retenção $t_\mathrm{R}$(Um) para o analito Um, que o analito gasta na fase móvel movendo-se através da coluna (Que é a razão para o subscrpt “M”, que significa móvel). Este parâmetro não está relacionado com o processo de retenção e depende do caudal e das características físicas da coluna (ou seja, comprimento, diâmetro, porosidade da fase estacionária). A diferença entre o tempo de retenção ($t_\mathrm{R}$) e o tempo morto ($t_\mathrm{M}$) representa o momento em que o analito é retido na fase estacionária ($t_\mathrm{S}$). Esta diferença é indicada como tempo de retenção reduzido $t_\mathrm{s}$ (ou $t ‘ _\mathrm{r}$) e é expressa pela fórmula:$$t_\mathrm{S}=t_\mathrm{R}-t_\mathrm{M}$$

O valor para $t_\mathrm{M}$ é geralmente obtido como uma aproximação usando compostos que são muito ligeiramente mantido, uma vez que pode ser difícil encontrar um composto que não é mantido em uma coluna cromatográfica. Por exemplo, durante os ensaios de HPLC, o solvente utilizado para injectar a amostra (quando diferente da fase móvel) pode ser um composto deste tipo, e o tempo de retenção deste pico de solvente pode ser tomado como tempo morto.