Morfologia e de Desenvolvimento Taxa do Golpe de Voar, Hemipyrellia ligurriens (Diptera: Calliphoridae): Entomologia Forense Aplicações
Resumo
Hemipyrellia ligurriens (Diptera: Calliphoridae) é um forense importante golpe de espécies de mosca apresentado em muitos países. Neste estudo, determinamos a morfologia de todos os estágios e a taxa de desenvolvimento de H. ligurriens criados em condições ambientais naturais na província de Phitsanulok, Norte da Tailândia. Foram descritas e demonstradas características morfológicas de todas as fases baseadas na observação sob um microscópio luminoso para fins de identificação. Além disso, foi dado tempo de desenvolvimento em cada fase. O tempo de desenvolvimento de H. ligurriens para a metamorfose completa; de ovo, larva, pupa a Adulto, levou 270,71 h para 1 ciclo de desenvolvimento. Os resultados deste estudo podem ser úteis não só para a aplicação na investigação forense, mas também para o estudo da sua biologia no futuro.
1. Introdução: Calliphoridae), especialmente larvas de mosca encontradas em cadáveres e / ou em cenas de morte, pode ser usado como evidência entomológica em investigações forenses, ou seja, estimando o intervalo pós-morte (IMP) e determinando substâncias tóxicas, trauma antemortem, e se a relocalização de restos havia ocorrido , como já documentado . A identificação morfológica precisa de espécimes de insectos é um dos factores muito importantes do ponto de vista aplicado, uma vez que fornecem provas relevantes para investigações forenses . Hemipyrellia ligurriens (Wiedemann) é uma espécie de Mosca-do-ar da Tailândia . Esta espécie de mosca é amplamente distribuída, cobrindo a Coreia, Taiwan, Laos, Singapura, Papua-Nova Guiné, Austrália, Índia, China, Filipinas, Sri Lanka, Malásia, Indonésia e Tailândia . Além de sua importância forense, h. ligurriens pode ser um incômodo nos mercados e jardins, e os adultos também são vetores mecânicos de patógenos, devido à sua atração por excreções humanas perto de ambientes ocupados pelo homem . Anteriormente, a morfologia de algumas fases imaturas (larvas egg, 3º-instar, e puparium) de H. ligurriens só foi estudada através de um microscópio eletrônico de varredura e um microscópio de luz . Por essa razão, a informação disponível de H. ligurriens é incompleta para identificar todas as evidências imaturas que podem ser encontradas nas cenas de morte. Além disso, a taxa de desenvolvimento desta espécie, que é dados importantes para estimar o IMP, não foi encontrada nas literaturas citadas. Além disso, os dados sobre o desenvolvimento específicos da população local são muito importantes para estimar a idade larval para determinar a Imp . Para aumentar a exatidão e a precisão quando a aplicação dessa informação em investigações forenses, o estudo de todas as suas fases imaturas e de desenvolvimento taxa é de grande interesse, porque a morfologia de cada uma poderia fornecer características específicas que tornam-se importantes para uma identificação correcta, e dados de crescimento, em particular condição poderia fornecer dados essenciais para o PMI estimativa. Portanto, este estudo teve como objetivo investigar as características distintivas de todas as suas fases imaturas observando-se sob o microscópio de luz, para dar alguns detalhes importantes para a identificação e para determinar a sua taxa de desenvolvimento, particularmente na condição em Phitsanulok província, norte da Tailândia. 2. Materiais e métodos
2.1. Manutenção de H. ligurriens no laboratório
a colónia de H. ligurriens usado neste estudo foi obtido originalmente pela coleta de moscas adultas com uma rede de varredura em áreas da aldeia de São Hin, Distrito de Muang Phitsanulok, Província de Phitsanulok, Tailândia (16°44 ‘ 18N; 100°13’44E). Todos os adultos de H. ligurriens foram coletados no campo e identificados com base em sua morfologia, usando a chave taxonômica de Tumrasvin et al. , antes de ser criado mais no laboratório. As moscas foram criadas em condições ambientais naturais na sala de criação aberta, de acordo com o método de Sukontason et al. . Brevemente, os adultos foram mantidos em uma gaiola de criação (30 × 30 × 30 cm) e alimentados com 2 tipos de alimentos: (i) uma mistura de 10% (w/v) solução de açúcar e 1,5% (v/v) multivitamínico xarope de solução (SETE MAR, Inglaterra) e (ii) frescos de fígado de porco. Fígado de porco fresco foi fornecido como alimento larval e local de oviposição. A presença de ovos no fígado de porco foi observada diariamente. Quando os ovos foram encontrados, o fígado de porco com ovos de mosca foram transferidos suavemente para uma caixa de criação de larvas usando fórceps, e então, 2 ou 3 pedaços (cerca de 50 g/dia) de fígado de porco fresco foram adicionados na caixa como alimento para as larvas. Alguns pedaços de fígado de porco fresco foram adicionados diariamente até que as larvas na caixa parou de se alimentar e se mover ou eles se tornaram o estágio pré-Upal (final do 3º instar). Todos os pedaços de fígado de porco que permaneceram na caixa de criação foram retirados da caixa. Apenas as pupas foram mantidas na caixa de criação e seladas firmemente até que o aparecimento de um adulto foi encontrado. Depois disso, a caixa foi colocada e aberta em uma gaiola de criação, a fim de libertar adultos da caixa para viver na gaiola de criação. A nova geração de moscas foi criada continuamente como mencionado acima.
2, 2. Morphology
Egg
In this study, egg specimens of H. ligurriens were obtained from the laboratory colony to investigate distinct features by using the potassium permanganate staining technique, according to previous description of Sukontason et al. . As características principais, como a morfologia da área mediana em torno do micropilo, e a escultura coriônica, foram observadas e fotografadas sob um microscópio de luz (Olympus, Japão), que foi conectado a uma câmera digital (Samsung S700, Coreia). Além disso, as larguras e comprimentos de 30 ovos de mosca também foram medidos sob o microscópio de luz calibrado. O desvio médio e padrão de largura e comprimento foram analisados usando o programa Excel (Microsoft office Enterprise 2007). este estudo determinou a morfologia e taxa de desenvolvimento em todos os estágios larvares (1º, 2º e 3º instares). A morfologia de todos os instares foi investigada usando o método de limpeza de hidróxido. Brevemente, 30 larvas de cada instar foram obtidas da colônia de laboratório e sacrificadas colocando-as em um copo contendo água quente (80°C) por 30 segundos para evitar que encolhessem . Depois disso, foram preservados em uma pequena garrafa de vidro contendo 70% de etanol. As larvas preservadas foram dissecadas individualmente em dois locais para obter três porções do corpo usando uma lâmina afiada sob um microscópio estéreo (Olympus, Japão), de acordo com o método descrito por Sukontason et al. . O primeiro corte foi posicionado no meio do segundo segmento torácico para ver o esqueleto interno do cefalofaríngeo e o espiráculo anterior externo. O segundo corte foi posicionado ao longo do 11º segmento do corpo, a fim de observar as características do espiráculo posterior. Como método de compensação, cada par de partes anterior e posterior foi deixado em uma placa de vidro contendo 10% (M/v) de solução de hidróxido de potássio por 1 dia (para o 1º instar) ou 2 dias (para o 2º e 3º instars). Subsequentemente, os espécimes foram lavados duas vezes com água destilada e neutralizados colocando-os numa placa de vidro contendo uma mistura de 35% de etanol e 1% de ácido acético glacial durante 30 minutos. Depois disso, os espécimes foram desidratados em série 50%, 70%, 80%, 95%, e etanol absoluto (RCI LABSCAN, Tailândia) por 30 minutos por concentração de álcool. Os espécimes desidratados foram transferidos para uma placa de vidro contendo xileno (PROLAB, França) e deixados durante 1 min antes de serem montados numa lâmina de vidro com 2-3 gotas de meio de montagem (Permount). Um deslizamento de cobertura foi colocado sobre cada espécime. As lâminas permanentes foram deixadas à temperatura ambiente durante 2 dias antes de serem observadas sob um microscópio de luz. O esqueleto cefalofaríngeo e espiráculo posterior de cada instar foram fotografados sob o microscópio de luz, que foi conectado à câmera digital. Além disso, o comprimento do corpo e a largura de todos os instares foram examinados. Trinta das primeiras larvas instares foram medidas usando um microscópio calibrado, enquanto o segundo e terceiro instares (n = 30 larvas/ cada instar) foram medidos com calipers vernier sob um microscópio de dissecação. O desvio médio e padrão de sua largura e comprimento do corpo foram analisados usando o programa Excel.
Pupa
nesta fase, a morfologia das partes anterior e posterior e a mudança de coloração foram estudadas. As partes anterior e posterior da pupária foram determinadas usando a técnica de limpeza do hidróxido de potássio, anteriormente descrita por Sukontason et al. . As partes anteriores da pupária eram os restos da cabeça contratada para o quarto segmento da pupária após as moscas terem emergido. Eles foram recrutados a partir da caixa de criação que as moscas já tinham emergido. Para cada parte posterior, o segmento caudal do pupário foi cortado com uma lâmina afiada sob o microscópio estéreo e, em seguida, transferido usando fórceps para a mesma placa de vidro que o utilizado para a parte anterior. Depois disso, eles foram embebidos em detergente de lavagem de pratos de 1% (v/v) para remover artefatos de superfície e/ou tecidos de fígado de porco. Como método de compensação, as partes anterior e posterior foram deixadas num tubo de ensaio contendo 10% (M/v) de solução de hidróxido de potássio e o tubo de ensaio foi transferido para um banho-maria a uma temperatura de 80°C durante 1 h. Em seguida, o processo de espécime foi realizado seguindo o descrito para a fase larva. As características importantes das partes anterior e posterior foram observadas e fotografadas sob o microscópio de luz, conectadas à câmera digital. O número de papilas em cada espiral posterior de 30 partes anteriores foi contado e calculado para a sua gama. Além disso, 30 puparias foram medidas pela sua largura e comprimento usando calipers vernier. O desvio médio e padrão de sua largura e comprimento foram analisados usando o programa Excel. Para observação da alteração da coloração, apenas um pupário que representava a cor da pupária na caixa de criação foi seleccionado e fotografado em 0, 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, e 24 h usando a câmera digital. Antes de tirar fotografias, puparium foi lavado em água destilada para remover artefatos da superfície.
adulto
os jovens adultos, de 5 a 7 dias de idade, foram obtidos da criação enjaulada por meio de um tubo de ensaio. Eles foram sacrificados colocando-os em um frigorífico (-4°C) por 2 h. Depois disso, eles foram gentilmente presos com um bom arranjo anatômico. As características importantes para a identificação foram examinadas e fotografadas sob o microscópio estéreo, conectado à câmera digital. Além disso, trinta adultos foram medidos para a largura e comprimento do corpo usando calipers vernier. Neste estudo, a largura do corpo significa a largura do segundo segmento torácico, e o comprimento do corpo é todo o comprimento do corpo, variando desde o olho composto médio até o último segmento do abdômen. O desvio médio e padrão de sua largura e comprimento do corpo foram analisados usando o programa Excel.
2, 3. Avaliação da taxa de desenvolvimento
para avaliação da taxa de desenvolvimento, os experimentos foram realizados na sala de criação de sistema aberto sob a temperatura ambiente natural da província de Phitsanulok, Norte da Tailândia. A temperatura e a umidade relativa foram registradas diariamente usando um termômetro e Higrômetro (termo-Higro TM870, China). Os intervalos (média ± DP) Da temperatura registada e da humidade relativa utilizados para determinar a taxa de desenvolvimento deste voo foram de 26,7 ± 0,61°C e 74 ± 3%, respectivamente. Para cada experiência, a taxa de desenvolvimento começou a encontrar larvas recém-nascidas (ou o primeiro estágio); a fase pré-Upal significava o endpoint. As larvas recém-nascidas foram reconhecidas como 0 h. larvas antigas. A avaliação da taxa de desenvolvimento neste estudo foi estudada separando as larvas recém-nascidas da mesma colónia de moscas adultas em 3 grupos. Cada grupo consistia de 150-200 larvas recém nascidas. Foram transferidos suavemente da caixa de criação para a nova, utilizando uma escova de tinta molhada (número 4). Fígado de porco fresco (≈50 g) era fornecido diariamente como uma fonte de alimento para as larvas em cada caixa de criação. As cinco maiores larvas foram removidas da caixa de criação a cada 3 h. foram sacrificadas colocando em água quente (≈80 ° C) durante 30 segundos para evitar encolhimento das larvas e foram preservadas em uma pequena garrafa de vidro contendo 70% de etanol. Todas as larvas preservadas foram medidas de comprimento do corpo usando um microscópio calibrado ou calipers vernier sob um microscópio de dissecação, dependendo de seus tamanhos. A relação entre o comprimento do corpo larval e o tempo de desenvolvimento foi analisada usando o programa Excel. Além disso, os períodos de vida em outras etapas foram gravados e analisados usando o programa Excel.
3. Resultados
3.1. Morfologia
ovo
O ovo de H. ligurriens foi alongado e afunilado nas extremidades anterior e posterior (Figura 1(a)). Mede 1,44 ± 0,11 mm de comprimento e 0,47 ± 0,04 mm de largura (quadro 1). Nesta fase, foi necessário um período de 10,3 ± 0,30 h antes de se transformar numa fase larvar (Quadro 1). O ovo não manchado era branco cremoso, enquanto aqueles depois de manchados com 1% de permanganato de potássio eram castanho claro em cor. A área mediana estava localizada dorsalmente, posicionando uma forma em Y que se estendia da extremidade anterior para quase a extremidade posterior [Figura 1 (b)]. A linha de incubação estava na vertical, mostrando assim espessamento escuro ao longo da área mediana [Figura 1 (a)]. A escultura coriônica apareceu como um padrão hexagonal, com seu limite reticular ligeiramente elevado como uma rede (Figura 1(c)).
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Ovo de Hemipyrellia ligurriens manchado com 1% de permanganato de potássio. a) ovo inteiro; MA: área mediana. B) extremidade Anterior do ovo que apresente o plastrão bifurcado e o micropilo; m: micropilo. c) escultura coriónica externa que mostre um padrão hexagonal, com a sua fronteira reticular ligeiramente elevada como uma rede. Barras = 100 m M para todos os números.em observação com o microscópio estéreo, todos os instares larvares de H. ligurriens exibiam larvas vermiformes típicas em forma de muscóide apontadas na parte anterior e contundente na parte posterior. O segmento caudal tinha um único par de espiráculos posteriores. O primeiro estágio foi relativamente pequeno, medindo 2,62 ± 0,70 mm de comprimento e 0,75 ± 0,35 mm de largura, com o tempo de desenvolvimento nesta fase para 12 ± 0,1 h (Tabela 1). O esqueleto cefalofaríngeo não estava bem desenvolvido (Figura 2 (a)), enquanto o espiráculo posterior tinha duas espirais espirais espirais se fundindo ventricalmente (Figura 2(e)). O segundo instar tinha 6,24 ± 1,67 mm de comprimento e 1,37 ± 0,19 mm de largura, com 12 ± 3 h de duração nesta fase (Quadro 1). O esqueleto cefalofaríngeo estava quase completo (Figura 2 (b)), enquanto o espiráculo posterior tinha duas fendas Espirais separadas com peritreme incompleto pigmentado fracamente (Figura 2(f)). O tamanho do 3º instar era o maior, medindo 12,18 ± 1,31 mm de comprimento e 2,32 ± 0,19 mm de largura. O tempo de desenvolvimento também foi o mais longo nesta fase, sendo 84 ± 3 h (Tabela 1). Os esqueletos cefalofaríngeos do início e do final do 3º instar eram semelhantes (Figuras 2 (c) e 2(d), resp.). As espirais posteriores do início(Figura 2 (g)) e do final do 3º instar(Figura 2 (h)) eram semelhantes, tendo 3 fendas Espirais separadas e peritreme completo com uma projeção interplit, exceto para este último mostrando um peritreme altamente pigmentado(Figura 2 (h)). As características distintivas dos três instares foram resumidas na Tabela 2.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Cephalopharyngeal esqueletos e posterior spiracles de Hemipyrellia ligurriens larvas. Esqueletos cefalofaríngeos de (a) 1º instar, (B) 2º instar, (C) 3º instar adiantado, e d) no final do 3º instar. Espiráculos posteriores de (e) 1º instar, (f) 2º instar, (g) 3º instar adiantado, e (h) 3º instar tardio. Barras = 100 m M para todos os números.
Pupa
O puparium of H. ligurriens was of typical coarctate form (Figure 3), which measured 6,82 ± 0.27 mm de comprimento e 2,76 ± 0,11 mm de largura (quadro 1). As alterações de cor observadas revelaram que o pupário inicial era branco cremoso de cor (0 h), com a extremidade posterior ainda truncada (Figura 3(a)). No entanto, a cor do puparium mudou gradualmente para amarelo-claro em 3 h após a pupariação (Figura 3(b)) e, em seguida, para castanho após cerca de 15 h [Figura 3 (f)]. A cor do pupário mudou para castanho-escuro após cerca de 18 h de observação (Figura 3(g)). Às 24 horas, o puparium mostrava a cor mais escura do marrom (Figura 3 (i)). A duração para toda a fase pupal foi de 152, 5 ± 30, 7 h (Tabela 1).
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
(i)
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
(i)
Color changes in puparia of Hemipyrellia ligurriens up to 24 h after pupariation. Puparium (a)–(i) at 0, 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, and 24 h, respectively. Bars = 100 𝜇m for all figures.
a observação das partes anterior e posterior da puparia apareceu como uma cor amarelo-marrom pálido após ser tratado com 10% de hidróxido de potássio. A placa anterior, prensada com um deslizamento de cobertura, tinha a forma de trapezóide com 2 espiráculos anteriores localizados em ambas as extremidades superiores (Figura 4(a)). Cada espiráculo anterior consistia de 5 a 7 papilas(Figura 4 b)). A coluna vertebral observada no terceiro segmento apresentava linhas de pontas de ponta pontiaguda [Figura 4 (c)]. Cada espiráculo posterior aparecia com três Espirais castanhos escuros altamente pigmentados, com um botão altamente pigmentado e um peritreme fracamente pigmentado (Figura 4(d)).
(a)
(b)
(c)
(d)
(a)
(b)
(c)
(d)
Puparium of Hemipyrellia ligurriens after treating with 10% KOH. (a) Anterior plate with trapezoid shape. (b) Anterior spiracle with 6 papillae. c) O Padrão da coluna vertebral no terceiro segmento que apresenta uma ponta de ponto único. d) espiráculos posteriores. Barras = 100 m M para todos os números.
Adulto
O adulto H. ligurriens foi 12.23 ± 0.61 mm de comprimento, de 2,85 ± 0,25 mm de espessura (Tabela 1), e metalizado cobre verde na aparência, com tons de cinzento branco pollinose na parte anterior do tórax (Figuras 5(a) e 5(b)). A cabeça da fêmea era dicótica, mas a do macho era subholopta (figuras 5(C) e 5(d)). A polinosidade facial Grayish foi encontrada em ambos os sexos (figuras 5(C) e 5(d)), e todo o terceiro segmento antenal foi castanho escuro ou laranja ventricular (figuras 5(C) e 5(d)). A abóbora era esbranquiçada [Figura 5(e)]. A Gena estava coberta de pelos negros [Figura 5 (f)]. A veia do tronco não tinha setulae(Figura 5 (g)). Foram encontrados dois conjuntos acrosticais pós-suturais no tórax [Figura 5 (h)]. Supraconvexidade foi encontrada pilose hair(Figura 5 (i)). Todas as características acima foram importantes para a identificação deste adulto voador.
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
(i)
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
(i)
Adults and important characteristics for identification of Hemipyrellialigurrien. (a) Dorsal view of the female. (b) Dorsal view of the male. (c) Frons of the female showing dichoptic eyes. (d) Frons of the male showing subholoptic eyes. e) visão Lateral do adulto mostrando squamae esbranquiçado (seta). f) maior ampliação da cabeça, com pelos negros na Gena (seta). g) asa que mostra a veia do tronco sem setulae (seta). h) tórax Dorsal. (I) Pilose hair on the supraconvexity (arrow). Barras = 200 m m para todos os números.
3.2. A avaliação da taxa de desenvolvimento
da taxa de desenvolvimento de H. ligurriens foi determinada durante o período de inquérito, com base na condição ambiente natural da província de Phitsanulok. A curva de crescimento do estágio larvar mostrou a forma sigmóide (Figura 6). Os dados sobre a taxa de desenvolvimento de criação, revelou que o tempo de desenvolvimento de larvas recém-eclodidas para o início do pupariation cresce rapidamente em um período total de 108 h. As larvas atingiram o seu máximo mediana do tempo em ≈42 h, e pupariation ocorreu no 108h. A expectativa de vida de todas as fases também foram resumidos na Tabela 1.
a Relação entre o tempo de desenvolvimento e larvas comprimento de Hemipyrellia ligurriens em ambiente natural condições (de 26,7 ± 0.61°C; 74 ± 3% RH) da província de Fitsanulok, Norte da Tailândia.
4. Discussão
dados relacionados com características importantes de insetos para identificação e desenvolvimento rápido e confiável no laboratório são pré-requisitos cruciais para a aplicação adequada nas investigações forenses. H. ligurriens é uma espécie de Mosca-do-bico de importância forense que foi registada em casos forenses na Malásia e na Tailândia . Este estudo centrou-se nas características importantes para a identificação de todas as fases do H. ligurrienos, com base na observação sob o microscópio de luz e tempo de desenvolvimento de cada etapa em estado ambiente natural com temperaturas médias e umidade relativa, que foram 26,7 ± 0,61°C e 74 ± 3%, respectivamente. Apesar de morfologia em algumas fases da H. ligurriens tem sido estudado anteriormente, utilizando o microscópio eletrônico de varredura e microscópio de luz , este estudo forneceu informações mais detalhadas sobre características distintivas e novas pistas para identificação através de técnicas simples para aumentar a precisão e exatidão, forense aplicação no futuro. Além disso, este estudo forneceu dados sobre o desenvolvimento de H. ligurriens, que podem ser usados na estimativa do imp de cadáveres em que esta espécie de mosca colonizou.escultura coriônica, largura e comprimento da área mediana foram relatados anteriormente como uma característica importante na identificação do ovo voador . A morfologia do ovo de H. ligurriens, observada neste estudo por coloração com 1% de permanganato de potássio e observando ao microscópio de luz, foi semelhante à observada em trabalhos anteriores, que investigaram usando o microscópio eletrônico de varredura . Por conseguinte, os resultados deste estudo confirmaram a eficácia do método de coloração, iniciado por Sukontason et al. , para fins de identificação de ovos de mosca. Os ovos manchados podiam ser observados claramente no microscópio de luz. Comparando os dados de estudos anteriores, o tamanho do H. ligurriens ovo no presente estudo foi maior do que a de outros sopram moscas, como Lucília cuprina, Ceylonomyia (= Chrysomya) nigripes, e Aldrichina grahami; no entanto, seu tamanho não foi diferente a partir dos tamanhos de Chrysomya megacephala e Achoetandrus (= Chrysomya) rufifacies . No entanto, o tamanho do ovo de mosca não pode ser utilizado como características primárias para a identificação , de acordo com informações de Erzinclioglu, que relatou que o tamanho do ovo de mosca dependia dos níveis dietéticos. Por conseguinte, a identificação dos ovos de mosca deve utilizar as características da largura do plastron, a morfologia da área do plastron em torno do micropilo como critérios principais e utilizar o tamanho como uma característica suplementar para a identificação dos ovos . com base em nossas referências, este estudo foi o primeiro estudo, mostrando morfologia do esqueleto cefalofaríngeo e espiráculo posterior em todas as larvas instares, observando sob o microscópio de luz. Esqueletos cefalofaríngeos e espiráculos posteriores das larvas foram vistos claramente como sendo diferentes em cada instar. Os resultados deste estudo estão de acordo com os relatórios anteriores . Além disso, este estudo mostrou o grau de pigmentação do peritreme em cada estágio. Pode ser uma nova pista para diferenciar a idade das larvas, especialmente entre o início e o final do instar. Com cada estágio de desenvolvimento definitivamente diferente, bem como o grau de pigmentação, os dados deste estudo podem ser úteis na identificação dos estágios larvares e idade das larvas desta mosca de sopro em detalhes como mencionado acima. o estudo sobre a morfologia da fase pupal forneceu resultados semelhantes aos relatórios anteriores . Os resultados da observação de alterações de coloração no tempo de H. ligurriens puparia foram primeiramente relatados neste estudo e podem ser outra nova evidência de suporte para determinar pelo menos a idade aproximada de puparia para aumentar a precisão do valor de PMI.
Este estudo demonstrou algumas fotografias de características distintivas para o uso na identificação de adultos h. liguriens. Estas fotografias de características peculiares deste estudo podem ser úteis para pessoas que não estão familiarizadas com a terminologia nas chaves taxonômicas. A atual chave taxonômica para a identificação de espécies de moscas-dos-ar na Tailândia foi dada por Kurahashi e Bunchu . A olho nu de um nãoentomologista, o adulto h. ligurriens parece semelhante a A. rufifacies na aparência. Portanto, a chance de erro de identificação pode ocorrer em ambas as espécies, especialmente na Tailândia, porque A. rufifacies foi a segunda espécie de Mosca-do-bico mais predominante da Tailândia, e coincidência de ambas as espécies em algumas províncias deste país foi encontrada . este estudo foi o primeiro relatório que forneceu tempo de desenvolvimento de H. liguriens em todas as fases. Os resultados mostraram que o tempo de desenvolvimento de H. ligurriens sob condições naturais no presente estudo (temperatura média de 26,7 ± 0.61°C e umidade relativa de 74 ± 3%) foi mais rápido do que o de C. megacephala e A. rufifacies, que foram estudadas, a uma temperatura média de 27,4°C . Além disso, o tempo de desenvolvimento de cada fase de H. ligurriens foi diferente do de C. megacephala e A. rufifacies. A taxa de desenvolvimento de cada espécie foi especificada, embora tenham crescido nas mesmas condições ou em condições relacionadas . Além disso, a variação dos tempos de desenvolvimento dentro de uma espécie de mosca-de-bico foi encontrada em populações geograficamente diferentes . São necessários dados de desenvolvimento específicos da população local para estimar a idade larvar para determinar a Imp. Portanto, os dados deste estudo são muito importantes para a aplicação posterior, particularmente na província de Phitsanulok.
de Dados, obtidos a partir de ambas as características morfológicas e de desenvolvimento tempo, cumprir as informações anteriores e fornecem novas evidências de apoio para a identificação de este golpe de espécies de mosca e aplicação na investigação forense, particularmente quando H. ligurriens está presente em cadáveres humanos. Além disso, podem ser úteis como dados de base no seu estudo de biologia no futuro.
agradecimentos
Este estudo foi apoiado principalmente por uma subvenção concedida a N. Bunchu, da Faculdade de Ciências Médicas da Universidade de Naresuan, e outro do fundo de pesquisa da Tailândia (MRG5280194). Os autores também agradecem ao centro de excelência em Biotecnologia Médica, Faculdade de Ciências Médicas, Universidade de Naresuan, e à Divisão de Administração de Pesquisa, Universidade de Naresuan, pelo apoio e defraying do custo de publicação.