agglutinatie

agglutinatie verwijst naar het fenomeen waarbij rode bloedcellen aan elkaar plakken in driedimensionale klonten. Agglutinatie is te wijten aan de binding van antilichamen aan rode bloedcellen. Wanneer enkele antilichamen binden aan meer dan één bloedcel, agglutineert vorm. Agglutinatie is meestal een pathologische bevinding en ondersteunend voor een diagnose van immuungemedieerde hemolytische anemie (IgM-antilichamen, die multivalent zijn, hebben meer kans om agglutinaten te vormen), maar er zijn enkele niet-pathologische oorzaken van agglutinatie. Oorzaken zijn:

• immuungemedieerde hemolytische anemie (IMHA): agglutinatie wordt vermoed als gevolg van multivalente IgM-of zelden divalente IgA-antilichamen. IgG anti-RBC antilichamen veroorzaken gewoonlijk geen agglutinatie.
• EDTA pseudoagglutinatie: EDTA kan verborgen epitopen in RBC ontmaskeren. De dieren die van nature voorkomen antilichamen tegen deze epitopes kunnen aan RBC binden veroorzakend agglutination. Dit kan foutief leiden tot een diagnose van IMHA, echter getroffen dieren zijn meestal niet bloedarmoede (in tegenstelling tot IMHA). Dit is gemeld bij een kat (Schaefer et al., 2009).
• Drugs: Heparine kan agglutinatie van paard RBC veroorzaken.

Rouleaux-vorming

agglutinatie versus rouleaux

rouleaux-vorming is een term die groepen rode bloedcellen beschrijft die stapels vormen, zoals stapels munten. Dit is een normale bevinding in het bloed van gezonde paarden en in mindere mate katten, maar wordt normaal gesproken niet gezien bij honden of runderen (in gezondheid of ziekte). Rode bloedcellen van het paard worden verondersteld om rouleaux te vormen omdat zij negatieve lading (veranderd zeta potentieel) op hun rode bloedcellen hebben verminderd. Rouleaux kan ook een marker van onderliggende ziekte zijn, zelfs bij paard en kat (rouleaux vorming kan overmatig zijn, dat wil zeggen groter dan verwacht, bij deze soorten). Overmatige rouleaux-vorming bij elke soort wijst op hyperglobulinemie. Merk op dat een lage albumine rouleaux vorming zal bevorderen (maar niet veroorzaken). Toename van twee typen globulinen leidt tot vorming van rouleaux:

• fibrinogeen: Dit is een β – 2 globuline en een acute fase reagens, dat wil zeggen waarden stijgen met ontsteking. Hoog fibrinogeen is ook een kenmerk van nierziekte bij paard en kat.
• immunoglobulinen: deze eiwitten, die migreren in de β-Of γ-regio ‘ s van een elektroforetogram, kunnen toenemen onder reactieve of neoplastische omstandigheden
  • reactief: ontsteking of antigene stimulatie. Een polyclonale gammopathie wordt verwacht.
  • neoplastisch: neoplasmata van B-lymfocyten of plasmacellen, bijv. B-cel lymfoom, B-cel chronische lymfatische leukemie, extramedullaire plasmacytoom, Solitaire plasma cel tumor van het bot, multipel myeloom. Een monoklonale gammopathie kan worden gezien met deze neoplasmata.

agglutinatie versus vorming van rouleaux

Agglutinaten kunnen soms van rouleaux worden onderscheiden door hun karakteristieke verschijning op bloeduitstrijkjes (agglutinatie vormt driedimensionale clusters, terwijl rouleaux stapels vormen), maar dit kan moeilijk zijn bij ernstige rouleaux. Evenzo kan een dia-agglutinatietest geen betrouwbaar onderscheid maken tussen agglutinatie en ernstige rouleaux-vorming. De beste manier om onderscheid te maken tussen deze twee verschijnselen (met belangrijke gevolgen voor diagnose en patiëntenzorg) is het uitvoeren van een zoutverdunningstest, die ook wel een zoutdispersie-test wordt genoemd. Dit wordt gedaan door het plaatsen van een druppel bloed tot 4 druppels of zo hoog als 10 druppels isotone zoutoplossing (0,9% NaCl), dat wil zeggen een 1:4 of 1: 10 verdunning van bloed tot zoutoplossing) en vervolgens het onderzoek van de verdunning als een natte mount (vergelijkbaar met die gedaan voor urine sedimenten, d.w.z. plaats een druppel van de verdunning op een dia, voeg een coverslip toe en onderzoek het vervolgens met het iris-diafgram van de microscoop gesloten of de microscoopcondensor naar beneden om het contrast te verhogen). Zoutverdunning zal rouleaux verspreiden maar geen agglutinatie (tenzij de agglutinatie wordt veroorzaakt door antilichamen met een lage aviditeit, in het bijzonder als de verdunning te lang blijft zitten vóór het onderzoek of als de RBC ‘ s worden gewassen vóór het onderzoek).