Microscopía de luz
Variedades de Microscopios de luz
La mayoría de los microscopios compuestos de hoy en día tienen un iluminador incorporado en la base. Un condensador ubicado debajo del escenario tiene lentes que enfocan la luz en la muestra y un diafragma que regula el contraste. Después de pasar a través de la muestra en el escenario, la luz entra en una lente del objetivo. La mayoría de los microscopios ópticos tienen tres o cuatro objetivos en una torreta giratoria. Estas lentes aumentan la imagen de 4 a 100 veces. La luz luego pasa por el tubo del cuerpo a una lente ocular que aumenta la imagen de 10 a 15 veces. Los microscopios de grado de investigación y los mejores microscopios para estudiantes tienen un par de lentes oculares para que se pueda ver la muestra con ambos ojos a la vez.
Hay muchas variedades de microscopios de luz compuestos para fines especiales. Para ver cultivos de tejidos cubiertos con medios líquidos, los biólogos pueden usar un microscopio de luz invertida en el que el cultivo se ilumina desde arriba y las lentes del objetivo se colocan debajo de la muestra. El microscopio de contraste de fase se puede utilizar para mejorar el contraste en muestras vivas, evitando así el uso de fijadores y manchas letales. El microscopio de luz polarizante se utiliza para analizar cristales y minerales , entre otras cosas. El microscopio de fluorescencia se utiliza para examinar estructuras que unen tintes fluorescentes especiales. Se puede usar, por ejemplo, para identificar dónde se une una hormona teñida a su célula diana.
Los microscopios de luz compuestos logran aumentos útiles de hasta 1200x y resoluciones de hasta aproximadamente 0,25 micrómetros. Es decir, dos objetos en una celda pueden estar tan cerca como 0.25 micrómetros y aún detectados como entidades separadas. Tal resolución es lo suficientemente buena para ver la mayoría de las bacterias y algunas mitocondrias y microvellosidades.
Estos microscopios generalmente requieren muestras delgadas, transparentes y relativamente pequeñas. También requieren que el usuario se ajuste al fenómeno de inversión óptica; si una muestra se mueve hacia la izquierda, aparece bajo el microscopio para moverse hacia la derecha; cuando se mueve hacia arriba, parece moverse hacia abajo; y viceversa. El microscopio estereoscópico funciona con aumentos y resoluciones mucho más bajos, pero tiene varias ventajas: (1) tiene dos sistemas de lentes que ven la muestra desde ángulos ligeramente diferentes, lo que le da a la muestra una apariencia estereoscópica (tridimensional); (2) puede usar luz transmitida o reflejada; y con luz reflejada, se puede usar para ver muestras opacas como rocas, fósiles, insectos, placas de circuitos electrónicos, etc.; (3) tiene una distancia de trabajo mucho mayor entre la muestra y la lente del objetivo, lo que permite el examen de objetos relativamente grandes y una manipulación más fácil de objetos bajo el microscopio; (4) la distancia de trabajo permite una disección relativamente fácil de especímenes, como insectos, lo que permite que las manos y los instrumentos lleguen al espacio de trabajo mientras se mira a través del microscopio; y (5) no produce inversión óptica; es decir, los movimientos hacia la derecha parecen ir hacia la derecha, lo que facilita mucho la disección y otras manipulaciones.
La utilidad de la microscopía de luz se rige por su uso de luz visible, que limita la resolución. Cuanto más corta sea la longitud de onda de la iluminación, mejor será la resolución. Los haces de electrones tienen longitudes de onda más cortas que los fotones. La invención del microscopio electrónico a finales de la década de 1930 y su refinamiento durante el próximo medio siglo permitieron una visualización enormemente mejorada de la estructura fina de las células y los tejidos.