mi a poliklonális antitest?
, Hogyan, hogy a poliklonális ellenanyagok
A poliklonális antitest gyűjteménye manyimmunoglobulins, minden generált egy másik B-sejt klón. Ezek az antitestek egyetlen antigénen különböző epitópokat vagy kötőhelyeket céloznak meg. A poliklonális antitesteket a több B-sejtes klónokból történő származtatás és a több epitóp későbbi célzása különbözteti meg a monoklonális antitestektől.
hogyan készítsünk poliklonális antitesteket
minden antitest-generáció, poliklonális vagy monoklonális, immunválasz kiváltásával kezdődik, amelyet immunizálásnak neveznek. A tervezett célokat beinjektálják a gazdaszervezetbe, amelyet az immunrendszer idegennek ismer el, és immunelzáródás vagy clearance elleni antitestekkel célozzák meg. Az immunválasz rögzítésének elmulasztása adjuvánsokat, immunogén anyagokat, például Freund adjuvánsát vagy kulcslyuk limpet hemocianint (KLH) igényel az immunbeszerzés további ösztönzése érdekében. Az immunizálás a poliklonális antitestek előállításához szükséges legtöbb. Az alábbiakban egy tipikus immunválaszt ismertetünk.
, Hogy az Antitestek Kezdődik Immunizálás
a Kezdeti Expozíciós az Elsődleges Immunválasz
a Kezdeti fogadó expozíció antigén, a megfelelő segédanyagok, expozíció nevezik “Prime” immunizálás. Az expozíció tipikus módszerei közé tartozik a bőrbe, peritoneumba, szubkután rétegbe vagy izomba történő injekció. Kevésbé gyakori alternatívák az orális és intranazális alkalmazás.A DNS-immunizálás a toxikus vagy más módon nehezen előállítható antigének feltörekvő technológiája is. Az antigén bármely későbbi expozícióját “boost” immunizációnak nevezik.
Antigénfeldolgozás antigénprezentáló sejtekkel
makrofágok, dendritikus sejtek (DC) és kisebb mértékben B-sejtek, minden antigént bemutató sejt (APCs), az antigént endocitózissal vagy fagocitózissal internalizálják. Az antigénfeldolgozás az antigént kisebb darabokra bontja, amelyeket ezután az APC felületére mozgatnak.
B-sejtek stimulálása
az APCs felületén bemutatott antigén felismerése stimuláló jelátviteli molekulák, citokinek felszabadulását indukálja a segítő T-sejtekből. Ezek a citokinek aktiválják a B-sejteket, amelyek szintén felismerték az antigént a B-sejt receptorukon (BCR) keresztül. Egyes B-sejtek nem igényelnek segítő T-sejt aktiválást a BCR-antigén kölcsönhatás után, általában gyorsabb immunválaszt eredményezve alacsonyabb affinitású antitestekkel. A Helper T-sejtek bevonása kritikus fontosságú a teljes immunválaszban, valamint a szabályozásbanöntolerancia.
Elterjedése a B-Sejtek Ellenanyag Váladék
az Aktivált B-Sejtek osztódnak, hogy hozzon létre mind a memória B-sejt, illetve plazma sejt populációk. Mindkét típusú sejt ugyanazt az epitópot ismeri fel. A plazmasejtek antitesteket szekretálnak a szérumba az immunfelismerés céljából, míg a memória B-sejtek hosszabb ideig fennmaradnak, gyors választ adva ugyanazon antigén másodlagos expozíciójára.
az immunválasz mérése
az antitestszintek mérése az immunizálási folyamat során szükséges az előrehaladás értékeléséhez. Az anelisa a célantigén ellen összehasonlítja az immunizált szérummintákat az előre immunizált szérummintákkal, amelyek feltárják az immunizálás által vezérelt immunválasz mértékét. A minták soros hígítása határozza meg az antitest titerét. Jellemzően a 1:A 64 000 titer robusztus immunválasznak tekinthető, amely elegendő a szérumszürethez vagy a limfocita fúzióhoz. Az alacsonyabb titerek szükségessé tehetik a későbbi boost immunizációkat, az alkalmazás alternatív módjait vagy további adjuvánsokat.
Poliklonális Antitest Szérum Betakarítás
Poliklonális ellenanyag termelést kell más, csak a helyreállítási a vér a fogadó állat, illetve elkülönítés, a mobiltelefon-frakció a szérumot tartalmazó frakció termelődő antitestek. Mivel számos antigén specifikus antitestet több aktivált B-sejt választ ki, a vérszérum a különböző antitest-klónok sok termékét tartalmazza, tehát a poliklonális antitest kifejezést. Pontosabban, egy antigén elleni többszörös klonális antitestek létrehozását úgy érik el, hogy mind az antigén fragmentumokká történő feldolgozását, mind a kisebb régiókkal rendelkező fragmentumokat epitópoknak nevezik. Mindegyiket egyedi BCRs-ek alapján lehet felismerni. A különálló B-sejtpopulációk specifikus, mégis különböző antitesteket választanak ki ugyanazon antigén ellen. Ezenkívül a szérum nemcsak a tervezett célantigén ellen irányuló antitesteket tartalmaz, hanem minden más immunglobulint más célok, gyógyszerek, hormonok stb. ez a szérumban van. A szérum közvetlenül használható molekuláris biológiai szondaként, de gyakran további tisztítást igényel egy adott vizsgálat érzékenységének és specifikusságának növelése érdekében. Affinitás Tisztítás ér antitest hasznosítás különböző mértékben attól függően, hogy a technika az alábbiak szerint, azonban egyik sem éri el az epitóp szint specificitását egy monoklonális antitest.
| Affinity Purification Technique | Pro | Con |
|---|---|---|
| Protein A/G | Simple, Cost effective | Recovers all immunoglobulin. |
| Antigen Specific | Recovers only antigen specific antibody. | nem triviális mennyiségű antigént igényel. |
Polyclonal Antibody Applications
| Application | Polyclonal AntibodyUse Rationale |
|---|---|
|
ELISA Detection Antibody
(direct, indirect, sandwich, and capture ELISA formats) |
Binds multiple epitopes to deliver many detection molecules.
|
|
ELISA Capture Antibody
|
Polyreactivity can maximally recover antigen from samples.
|
|
Western Blot
Detection Antibody |
Multiple epitope recognition can allow for antigen changes (denaturing/linearizing).
|
|
Target recognized by many Ab for maximal drug delivery, immune recruitment, blocking, or activation.
|
|
|
klinikai vizsgálatok
|
potenciálisan megnövekedett kimutatási kapacitás.
|
poliklonális antitestekkel kapcsolatos szolgáltatások
OurPolyExpress™ szolgáltatás költséghatékony és gyors módja az egyedi molekuláris szondák készítésének. Az antigén szekvenciától a szállított antitestekig 45 nap alatt garantált. Az antitest-fejlődés még nagyobb ellenőrzését keresi? Vessen egy pillantást néhány más antitest szolgáltatásra:
- DNS immunizálás, specialitásunk. Bármely antitestfejlesztési projekt megkezdéséhez. Kijátssza az in vitro fehérjeantigén termelést, és nehéz célokkal foglalkozik.
- a MonoExpress™ antitest Service szolgáltatás iparági vezető alkalmazási garanciákat hordoz, biztosítva a sikerességet az Ön tesztjeiben.
- az anti-idiotípus antitestek megkönnyítik a terápiás antitest gyógyszerek PK vagy PD tesztelését. Csak a cél antitest CDR-jét észlelik.
12 éves tapasztalattal Egyedi antitestek kifejlesztése, a projekt szakértői kezében van. Kap egy idézet ma!
idézetek és megrendelés
ügyfélszolgálati képviselőink a nap 24 órájában, hétfőtől péntekig, hogy segítsenek.