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Temps de rétention et temps mort

La plupart des techniques de séparation consistent en une colonne chromatographique, une phase stationnaire et une phase mobile, et utilisent une terminologie commune. Par conséquent, il est préférable d’en apprendre certains décrits dans le manuel pour la CLHP (Réf.1) en vue d’ensemble:

Le temps de rétention $t_\mathrm{R} solsoluté A peut être défini comme le temps entre l’injection de l’échantillon et le temps d’élution du composé, prélevé au maximum (sommet) du pic appartenant à l’espèce moléculaire spécifique A (connue ou inconnue). Le temps de rétention indique combien de temps il faut pour qu’un composé A élue de la colonne (de l’injecteur au détecteur). Le temps de rétention du dernier pic (si l’échantillon contient plusieurs composés) dans un chromatogramme est utilisé pour estimer la durée nécessaire du cycle chromatographique. En général, pour une espèce moléculaire A, le temps de rétention peut être indiqué commett_\mathrm{R}$(A) et le temps est généralement mesuré en $\pu{min}$. Cependant, la partie « (A) » dans la notation est parfois omise, maistt_\mathrm{R} is est toujours liée à une espèce moléculaire spécifique.

Le temps de rétention dépend non seulement de la structure de la molécule spécifique, mais aussi de facteurs tels que la nature des phases mobiles et stationnaires, le débit de la phase mobile et les dimensions de la colonne chromatographique. Le temps de rétention est généralement caractéristique d’un composé spécifique dans une séparation donnée. Pour cette raison, le temps de rétention est essentiel pour identifier les analytes une fois que leur temps de rétention est connu (par exemple, en utilisant des étalons).

Le temps mort $t_\mathrm{M}$, qui est le temps nécessaire à une espèce moléculaire non retenue pour éluer de la colonne chromatographique, présente un intérêt particulier dans une séparation. Le temps mort est également connu sous le nom de temps vide ou temps de rétention. Le temps morttt_\mathrm{M} can peut également être interprété comme faisant partie du temps de rétentiontt_\mathrm{R}A (A) pour l’analyte A, que l’analyte passe dans la phase mobile se déplaçant dans la colonne (c’est la raison pour laquelle l’indice « M » signifie mobile). Ce paramètre n’est pas lié au processus de rétention et dépend du débit et des caractéristiques physiques de la colonne (longueur, diamètre, porosité de la phase stationnaire). La différence entre le temps de rétention ($t_\mathrm{R}$) et les temps morts ($t_\mathrm{M}$) représente le temps de l’analyte Un est conservé sur la phase stationnaire ($t_\mathrm{S}$). Cette différence est indiquée comme temps de rétention réduittt_\mathrm{S}$ (outt’_\mathrm{R}$) et est exprimée par la formule:$$t_\mathrm{S} =t_\mathrm{R} – t_\mathrm{M}

La valeur dett_\mathrm{M} is est généralement obtenue comme approximation en utilisant des composés très légèrement retenus, car il peut être difficile de trouver un composé qui n’est pas du tout retenu sur une colonne chromatographique. Par example, lors d’essais HPLC, le solvant utilisé pour injecter l’échantillon (lorsqu’il est différent de la phase mobile) peut être un tel composé, et le temps de rétention de ce pic de solvant peut être pris comme temps mort.

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