Agglutinaatiolla

Agglutinaatiolla tarkoitetaan ilmiötä, jossa punasolut tarttuvat toisiinsa kolmiulotteisina möhkäleinä. Agglutinaatio johtuu vasta-aineiden sitoutumisesta punasoluihin. Kun yksittäiset vasta-aineet sitoutuvat useampaan kuin yhteen verisoluun, muodostuu agglutinaatteja. Agglutinaatio on yleensä patologisen löydön ja tukee diagnoosin immuunivälitteinen hemolyyttinen anemia (IgM vasta, jotka ovat multivalent, ovat todennäköisemmin muodostaa agglutinaatteja), mutta on olemassa joitakin ei-patologisia syitä agglutinaation. Syyt ovat:

• immuunivälitteinen hemolyyttinen anemia (IMHA): agglutinaatiota epäillään multivalentin IgM: n tai harvoin kaksiarvoisen IgA: n vasta-aineiden vuoksi. IgG anti-RBC-vasta-aineet eivät yleensä aiheuta agglutinaatiota.
• EDTA pseudoagglutinaatio: EDTA voi paljastaa piilotettuja epitooppeja RBC: ssä. Eläimet, joilla on luonnossa esiintyviä vasta-aineita näille epitoopeille, voivat sitoutua RBC: hen aiheuttaen agglutinaation. Tämä voi virheellisesti johtaa diagnoosi IMHA, kuitenkin vaikuttaa eläimet eivät yleensä aneeminen (toisin kuin IMHA). Tämä on raportoitu kissan (Schaefer et al., 2009).
• huumeet: Hepariini voi indusoida hevosen RBC: n agglutinaation.

Rouleaux-muodostuma

agglutinaatio vastaan rouleaux

Rouleaux-muodostuma on termi, joka kuvaa punaisten verisolujen ryhmiä, jotka muodostavat pinoja, kuten pinoja kolikoita. Tämä on normaali löydös terveiden hevosten ja vähemmässä määrin kissojen veressä, mutta sitä ei yleensä nähdä koirilla tai naudoilla (terveydessä tai sairaudessa). Hevosen punasolujen arvellaan muodostavan rouleaux ’ ta, koska ne ovat vähentäneet negatiivista varausta (muuttunutta zeta-potentiaalia) punasoluissaan. Rouleaux voi olla perussairauden merkkiaine myös hevosella ja kissalla (rouleaux-muodostuminen voi olla näissä lajeissa liiallista eli odotettua suurempaa). Liiallinen rouleaux-muodostuminen millä tahansa lajilla viittaa hyperglobulinemiaan. Huomaa, että alhainen albumiini edistää rouleaux muodostumista (mutta ei aiheuta sitä). Kahdentyyppisten globuliinien lisääntyminen johtaa rouleaux-muodostumiseen:

• fibrinogeeni: Tämä on β-2-globuliini ja akuutin vaiheen reaktantti, eli arvot nousevat tulehduksen myötä. Korkea fibrinogeeni on piirre myös hevosen ja kissan munuaissairaudessa.
• immunoglobuliinit: nämä proteiinit, jotka vaeltavat elektroforetogrammin β-tai γ-alueilla, voivat lisääntyä reaktiivisissa tai neoplastisissa olosuhteissa
  • reaktiivinen: tulehdus tai antigeeninen stimulaatio. Polyklonaalista gammopatiaa on odotettavissa.
  • neoplastiset: B-lymfosyyttien tai plasmasolujen kasvaimet, esim. B-solulymfooma, B-solun krooninen lymfaattinen leukemia, ekstramedullaarinen plasmasytooma, luuston yksinäinen plasmasolukasvain, multippeli myelooma. Näiden kasvainten yhteydessä voi esiintyä monoklonaalista gammopatiaa.

agglutinaatio versus rouleaux-muodostuma

Agglutinaatit voidaan joskus erottaa rouleaux-agglutinaatiosta sen perusteella, että ne esiintyvät veritahroille ominaisella tavalla (agglutinaatio muodostaa kolmiulotteisia klustereita, kun taas rouleaux muodostaa pinoja), mutta tämä voi olla vaikeaa vaikealla rouleaux-muodolla. Vastaavasti liukuagglutinaatiotestillä ei voida luotettavasti erottaa agglutinaatiota ja vaikeaa rouleaux-muodostumista. Paras tapa erottaa nämä kaksi ilmiötä (joilla on tärkeä seuraus diagnoosille ja potilaan hoidolle) on tehdä suolaliuoksen laimennustesti, jota kutsutaan myös suolaliuoksen dispersiotestiksi. Tämä tehdään asettamalla yksi tippa verta 4 tippaa tai jopa 10 tippaa isotonista suolaliuosta (0,9% NaCl), TS. 1:4 tai 1:10 laimentamalla verta suolaliuokseen) ja sitten tutkitaan laimennus märkänä mount (samanlainen kuin tehdään virtsan sedimentit, ts. aseta tippa laimennosta dialle, lisää coverslip ja sitten tutkia sitä iiris diaphgram mikroskoopin suljettu tai mikroskoopin kondensaattori alas lisätä kontrastia). Suolaliuoslaimennus hajottaa rouleaux ’ n, mutta ei agglutinaatiota (paitsi jos agglutinaatio johtuu alhaisesta sidospitoisuudesta, erityisesti jos laimennus jätetään liian pitkäksi aikaa ennen tutkimusta tai jos punasolut pestään ennen tutkimusta).