Articles

Retenční čas a mrtvý čas

Většina separačních technik se skládají z chromatografické kolony, stacionární fáze a mobilní fázi, a používání společné terminologie. Proto je lepší se naučit některé popsané v učebnici pro HPLC (Ref .1) jako přehled:

retenční čas $t_\mathrm{R}$ rozpuštěné látky A může být definována jako doba od injekce vzorku na době eluční směsi, které bylo přijato na maximum (vrchol) vrchol, který patří do specifických molekulárních druhů (známé nebo neznámé). Retenční doba udává, jak dlouho trvá, než se sloučenina a eluuje ze kolony (z injektoru do detektoru). Retenční doba posledního píku (pokud vzorek obsahuje více sloučenin) v chromatogramu se používá k odhadu potřebné délky chromatografického běhu. Obecně platí, že pro molekulární druh A může být retenční čas označen jako $t_ \ mathrm{R}$(A)a čas se obvykle měří v $ \ pu{min}$. Část “ (a)“ v notaci je však někdy vynechána, přesto $t_\mathrm{R}$ vždy souvisí s konkrétním molekulárním druhem.

Retenční čas závisí nejen na struktuře konkrétní molekulu, ale také na faktorech, jako jsou povaha mobilní a stacionární fáze, průtok mobilní fáze a rozměry chromatografické kolony. Retenční čas je obvykle charakteristický pro konkrétní sloučeninu v dané separaci. Z tohoto důvodu je retenční čas rozhodující pro identifikaci analytů, jakmile je jejich retenční čas znám (např. pomocí standardů).

zvláštní zájem v oddělení je mrtvý čas $t_\mathrm{M}$, což je doba, nonretained molekulární druhů potřebuje eluovány z chromatografické kolony. Mrtvý čas je také známý jako void time nebo holdup time. Mrtvý čas $t_\mathrm{M}$ lze také interpretovat jako součást retenční čas $t_\mathrm{R}$(A) pro analyt, který analyt stráví v mobilní fázi pohybu přes sloupec (To je důvod pro subscrpt „M“ znamená mobilní). Tento parametr nesouvisí s retenčním procesem a závisí na průtoku a fyzikálních vlastnostech kolony (tj. délka, průměr, pórovitost stacionární fáze). Rozdíl mezi retenčním časem ($t_\mathrm{R}$) a mrtvý čas ($t_\mathrm{M}$) představuje čas analytu A je zachována na stacionární fázi ($t_\mathrm{S}$). Tento rozdíl je indikován jako snížená retenční čas $t_\mathrm{S}$ (nebo $t’_\mathrm{R}$) a je vyjádřen vzorcem:$$t_\mathrm{S}=t_\mathrm{R}-t_\mathrm{M}$$

hodnota pro $t_\mathrm{M}$ je obvykle získán jako aproximace pomocí sloučenin, které jsou velmi lehce udržel, protože to může být obtížné najít sloučeninu, která není vůbec uchovávány na chromatografické koloně. Například, během HPLC běží, použité rozpouštědlo pro injekční aplikaci vzorku (pokud se liší od mobilní fáze), může být takové sloučeniny, a retenční čas tohoto rozpouštědla vrchol může být užíván jako mrtvá doba.

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna. Vyžadované informace jsou označeny *