Abstrakt

Hemipyrellia ligurriens (Diptera: Calliphoridae) je forenzně významných druhů masařek, představila v mnoha zemích. V této studii, určili jsme morfologii všech stádií a vývojovou rychlost H.ligurriens chovaný za přirozených okolních podmínek v provincii Phitsanulok, Severní Thajsko. Morfologické znaky všech stupňů založené na pozorování pod světelným mikroskopem byly popsány a demonstrovány za účelem použití pro identifikační účely. Navíc byl dán čas vývoje v každé fázi. Doba vývoje h. ligurriens k dokončení metamorfózy; od vajíčka, larvy, kukly až po dospělého, trvalo 270,71 h po dobu 1 cyklu vývoje. Výsledky této studie mohou být užitečné nejen pro použití ve forenzním vyšetřování, ale také pro studium biologie v budoucnu.

1. Úvod

exempláře much (Diptera: Calliphoridae), zejména larvy nalezené v mrtvoly a/nebo na smrt scény, může být použit jako entomologické důkazy, forenzní vyšetřování, to znamená, že odhad posmrtné intervalu (PMI) a stanovení toxických látek, předsmrtné trauma, a zda přemístění ostatků došlo , jak již bylo zdokumentováno . Přesná morfologická identifikace vzorků hmyzu je jedním z velmi důležitých faktorů z aplikovaného hlediska, protože poskytují relevantní důkazy pro forenzní vyšetřování .

blow fly druhů, Hemipyrellia ligurriens (Wiedemann) je forenzně důležitých rána létat druhů, jak bylo oznámeno již dříve, od případů, v Thajsku a Malajsii . To fly druh je široce distribuován, pokrývající Koreje, Tchaj-wanu, Laos, Singapur, Papua Nová Guinea, Austrálie, Indie, Čína, Filipíny, Srí Lanka, Malajsie, Indonésie a Thajsko . Kromě forenzní význam, H. ligurriens může být na obtíž v trhy a zahrady, a dospělí jsou také mechanické vektory patogenů, vzhledem k jejich přitažlivost lidských exkrementů v blízkosti lidských obývaných prostředí . Dříve, morfologie některých nezralých stadií (vajíčko, 3.-instar larvy, a kuklu) H. ligurriens byl studován pouze pozorováním pod elektronovým mikroskopem a pomocí světelného mikroskopu . Z tohoto důvodu jsou dostupné informace h. ligurriens neúplné pro identifikaci všech nezralých důkazů, které lze nalézt ve scénách smrti. Navíc, vývojová rychlost tohoto druhu, která je důležitá data pro odhad PMI, nebyla v citovaných literaturách nalezena. Navíc, vývojová data specifická pro místní populaci jsou velmi důležitá pro odhad larválního věku pro stanovení PMI . Zvýšit přesnost a preciznost, při použití této informace ve forenzní šetření, studie o všechny své nedospělé fáze a vývojové kurzu je velký zájem, protože morfologie každý z nich by mohl poskytnout specifické vlastnosti, které budou důležité pro správnou identifikaci a růstu dat, a to zejména podmínka by mohla poskytnout základní data pro odhad PMI. Proto se tato studie zaměřené na vyšetřování charakteristické vlastnosti všech jeho nezralé etapy pozorování pod světelným mikroskopem, aby některé důležité detaily pro identifikaci a určit jeho vývojové rychlost, zvlášť ve stavu, v Phitsanulok provincie, severní Thajsko.

2. Materiály a metody

2.1. Údržba h. ligurriens v laboratoři

kolonie h. ligurriens použitá v této studii byla získána původně sběrem dospělé mouchy s rozsáhlou síť v oblasti Sao Hin Village, Muang Phitsanulok okres, provincie Phitsanulok, Thajsko (16°44’18N; 100°13’44E). Všichni dospělí h. ligurriens byli shromážděni v terénu a identifikováni na základě jejich morfologie, pomocí taxonomického klíče Tumrasvin et al. , před dalším chováním v laboratoři. Mouchy byly chovány v přirozeném okolním stavu v chovné místnosti s otevřeným systémem, podle metody Sukontason et al. . Krátce, dospělí byli udržovány v chovné klece (30 × 30 × 30 cm) a fed se 2 druhy potravin: (i) směs 10% (w/v) roztok cukru a 1,5% (v/v) multivitaminový sirup řešení (SEDM SEA, Anglie) a (ii) čerstvá vepřová játra. Čerstvá vepřová játra byla poskytována jako larvální jídlo a místo ovipozice. Přítomnost vajec na vepřové játrech byla pozorována denně. Když vejce bylo zjištěno, že vepřová játra mají létat vejce byly převedeny jemně do larva-chov pole pomocí kleští, a pak, 2 nebo 3 kusy (≈50 g/den), čerstvá vepřová játra byly přidány v krabici jako potrava pro larvy. Některé kousky čerstvé vepřové játra byly přidány denně, dokud larvy v krabici zastavil krmení a pohybu, nebo se stal prepupal fázi (pozdní 3. instar). Všechny kusy vepřových jater, které zůstaly v chovné krabici, byly z krabice odstraněny. Pouze kukly byly drženy v odchovném boxu a těsně utěsněny, dokud nebyl nalezen výskyt dospělého. Po tom, krabice byla umístěna a otevřen v chovné kleci za účelem uvolnění dospělí z krabice žít v chovné kleci. Nová generace mušek byla chována nepřetržitě, jak bylo uvedeno výše.

2.2. Morfologie

Vejce
V této studii, vejce exempláře H. ligurriens byly získány z laboratorních kolonií, aby prošetřila různé funkce pomocí manganistanu draselného barvení technika, podle předchozí popis Sukontason et al. . Hlavní vlastnosti, jako je morfologie medián okolí micropyle, a choriových sochařských, byly pozorovány a fotografovány pod světelným mikroskopem (Olympus, Japonsko), který byl připojen k digitální fotoaparát (Samsung S700, Korea). Dále byly pod kalibrovaným světelným mikroskopem měřeny také šířky a délky 30 létajících vajec. Střední a směrodatná odchylka šířky a délky byly analyzovány pomocí programu Excel (Microsoft office Enterprise 2007).

Larva
Tato studie určuje morfologie a vývojové rychlost ve všech larválním stádiu (1., 2., a 3. instars). Morfologie všech instarů byla zkoumána metodou čištění hydroxidů. Stručně řečeno, 30 larev každého instaru bylo získáno z laboratorní kolonie a obětováno jejich umístěním do kádinky obsahující horkou vodu (80°C) po dobu 30 sekund, aby se zabránilo jejich smršťování . Poté byly konzervovány v malé skleněné láhvi obsahující 70% ethanolu. Konzervované larvy byly vyjmuty jednotlivě na dvou místech získat tři části tělesa pomocí ostrou čepel pod stereo mikroskopem (Olympus, Japonsko), podle metody popsané Sukontason et al. . První řez byl umístěn uprostřed druhého hrudního segmentu pro prohlížení vnitřní kostry cefalofaryngeální a vnější přední spiracle. Druhý řez byl umístěn přes 11 tělo segmentu s cílem pozorovat vlastnosti zadní průduch. Jako clearing metoda, každá dvojice přední a zadní částí zůstal v skleněnou desku obsahující 10% (w/v) roztoku hydroxidu draselného pro 1 den (pro 1. instar) nebo 2 dny (pro 2. a 3. instars). Následně byly vzorky dvakrát promyty destilovanou vodou a neutralizovány umístěním na skleněnou desku obsahující směs 35% ethanolu a 1% ledové kyseliny octové po dobu 30 minut. Poté byly vzorky dehydratovány sériově v 50%, 70%, 80%, 95%, a absolutní ethanol (Rci LABSCAN, Thajsko) po dobu 30 minut na koncentraci alkoholu. Dehydratované vzorky byly přeneseny na skleněnou desku obsahující xylen (Prolab, Francie) a ponechány po dobu 1 minuty před montáží na skleněné sklíčko s 2-3 kapkami montážního média (Permount). Na každý vzorek byl umístěn krycí skluz. Permanentní sklíčka byla ponechána při pokojové teplotě po dobu 2 dnů před pozorováním pod světelným mikroskopem. Na cephalopharyngeal kostru a zadní průduch každého instaru byly fotografovány pod světelným mikroskopem, který byl připojen k digitální fotoaparát. Kromě toho byla zkoumána délka a Šířka těla všech instarů. Třicet z prvního instaru byly měřeny pomocí kalibrovaných mikroskopem, zatímco druhý a třetí instars (n = 30 larvy/ každý instar) byly měřeny pomocí posuvného měřidla pod stereoskopickým mikroskopem. Střední a směrodatná odchylka jejich šířky a délky těla byla analyzována pomocí programu Excel.

Pupa
V této fázi byla studována morfologie přední a zadní části a změna zbarvení. Přední a zadní části pupárie byly stanoveny pomocí techniky čištění hydroxidu draselného, dříve popsané Sukontasonem et al. . Přední části po kuklu byly zbytky smluvně hlavu do čtvrtého segmentu po kuklu po mouchy se objevily. Byli rekrutováni z odchovného boxu, který se již objevil. Pro každé zadní část ocasní část kuklu byl řez s ostrým nožem pod stereo mikroskopem a pak převedeny pomocí kleští do stejné skleněné desky, který se používá pro přední část. Poté byly namočeny v 1% (v/v) mycím prostředku na mytí nádobí, aby se odstranily povrchové artefakty a / nebo tkáně vepřových jater. Jako clearing metoda, přední a zadní části byly ponechány do zkumavky obsahující 10% (w/v) hydroxidu draselného, a zkumavka byla přenesena do vodní lázně nastavené na teplotu 80°C po dobu 1 h. Poté byl proces vzorku proveden podle postupu popsaného pro Stadium larvy. Důležité rysy přední a zadní části byly pozorovány a fotografovány pod světelným mikroskopem připojeným k digitálnímu fotoaparátu. Počet papil v každé zadní spirále 30 přední části byly spočítány a vypočteny pro jeho rozsah. Kromě toho bylo třicet pupárií měřeno na jejich šířku a délku pomocí vernierových třmenů. Střední a směrodatná odchylka jejich šířky a délky byly analyzovány pomocí programu Excel. Pro pozorování zbarvení se mění, jen jedna v kuklu, která představuje barvu jediná kukla v chovu box byl vybrán a fotografoval v 0, 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, a 24 h pomocí digitálního fotoaparátu. Před fotografováním bylo puparium promyto destilovanou vodou, aby se odstranily povrchové artefakty.

Dospělí
mladí dospělí ve věku 5-7 dnů byli získáni z odchovu v kleci pomocí zkumavky. Byly obětovány umístěním do chladničky (-4°C) po dobu 2 h. poté byly jemně připnuty s dobrým anatomickým uspořádáním. Důležité vlastnosti pro identifikaci byly zkoumány a fotografovány pod stereo mikroskopem připojeným k digitálnímu fotoaparátu. Kromě toho bylo třicet dospělých měřeno na šířku a délku těla pomocí vernierových třmenů. V této studii Šířka těla znamená šířku 2. hrudního segmentu a délka těla je celá délka těla, od středního složeného oka po poslední segment břicha. Střední a směrodatná odchylka jejich šířky a délky těla byla analyzována pomocí programu Excel.

2.3. Vývojové Hodnotit Hodnocení

Pro posouzení vývojové sazba, experimenty byly provedeny v open-systém chovu místnosti pod přírodní okolní teplotě Phitsanulok provincie, severní Thajsko. Teplota a relativní vlhkost byly denně zaznamenávány pomocí teploměru a vlhkoměru (Thermo-Hygro TM870, Čína). Rozsahy (průměr ± SD) zaznamenané teploty a relativní vlhkosti použité ke stanovení rychlosti vývoje této mouchy byly 26,7 ± 0,61°C a 74 ± 3%. U každého experimentu začala vývojová rychlost nálezem nově vylíhnutých larev (nebo 1. instar); prepupální fáze znamenala koncový bod. Nově vylíhnuté larvy byly rozpoznány jako 0 h staré larvy. Hodnocení vývojové rychlosti v této studii bylo studováno oddělením nově vylíhnutých larev od stejné kolonie dospělých mušek do 3 skupiny. Každá skupina se skládala ze 150-200 nově vylíhnutých larev. Byly jemně přeneseny z odchovného boxu do nového pomocí mokrého štětce (číslo 4). Čerstvá vepřová játra (≈50 g) byla poskytována denně jako zdroj potravy pro larvy v každé chovné krabici. Pět největších larvy byly odstraněny z chovu pole každé 3 h. Byli obětováni umístěním v horké vodě (≈80°C) po dobu 30 sekund, aby se zabránilo larvy smrštění a byly zachovány v malé skleněné láhve obsahující 70% ethanolu. Všechny konzervované larvy byly měřeny délky těla pomocí kalibrovaný mikroskop nebo vernier třmeny pod mikroskopem, v závislosti na jejich velikosti. Vztah délky larválního těla a doby vývoje byl analyzován pomocí programu Excel. Kromě toho byla zaznamenána a analyzována životnost v jiných fázích pomocí programu Excel.

3. Výsledky

3.1. Morfologie

Vejce
vejce H. ligurriens bylo protáhlé a zúžené na obou přední a zadní konce (Obrázek 1(a)). Měřil 1,44 ± 0,11 mm na délku a 0,47 ± 0,04 mm na šířku (Tabulka 1). V této fázi trvalo 10,3 ± 0,30 h, než se línání stalo larválním stádiem (Tabulka 1). Nebarvené vejce bylo krémově bílé; zatímco po obarvení 1% manganistanem draselným byly světle hnědé barvy. Střední části byl umístěn dorsálně, umístění Y-tvaru, která se táhla od předního konce k téměř posteriorního konce (Obrázek 1(b)). Líhnutí linie byla ve svislé poloze, což ukazuje tmavé zesílení podél střední oblasti(Obrázek 1 (a)). Choriová socha se objevila jako šestiúhelníkový vzor, jehož retikulární hranice se mírně zvedala jako síť (Obrázek 1 (c)).

Obrázek 1

Vejce Hemipyrellia ligurriens potřísněné 1% manganistanu draselného. a) celé vejce; MA: střední Plocha. b) přední konec vajíčka s rozvětveným plastronem a mikropylem; M: mikropyly. (c) vnější choriová plastika znázorňující šestiúhelníkový vzor, s jeho retikulární hranicí mírně vyvýšenou jako síť. Tyče = 100 𝜇m pro všechny obrázky.

Larva
pozorování s stereo mikroskopem, všechny larvy instars H. ligurriens zobrazeny typické muscoid ve tvaru slepé larvy, které byl ukázal v přední a tupé v zadní. Kaudální segment měl jediný pár zadních spiracles. První instar byla relativně malá, měření 2.62 ± 0,70 mm na délku a 0,75 ± 0,35 mm na šířku, s vývojovými čas v této fázi pro 12 ± 0.1 h (Tabulka 1). Na cephalopharyngeal kostra nebyla dobře vyvinuté (Obrázek 2(a)), zatímco zadní průduch měl 2 spiracular rozparky sloučení ventrálně (Obrázek 2(e)). Druhý instar měl délku 6,24 ± 1,67 mm a šířku 1,37 ± 0,19 mm s dobou trvání 12 ± 3 h v této fázi (Tabulka 1). Na cephalopharyngeal kostra byla téměř kompletní (Obrázek 2(b)), zatímco zadní průduch měl 2 oddělené spiracular rozparky s slabě pigmentované neúplné peritreme (Obrázek 2(f)). Velikost 3. instaru byla největší, měřila 12,18 ± 1,31 mm na délku a 2,32 ± 0,19 mm na šířku. Doba vývoje byla také nejdelší v této fázi, 84 ± 3 h (Tabulka 1). Cefalofaryngeální kostry časného a pozdního 3. instaru byly podobné (obrázky 2(c) a 2(d), resp.). Zadní průduchy z počátku (viz Obrázek 2(g)) a pozdní 3. instar (Obrázek 2(h)) byly podobné, má 3 oddělené spiracular štěrbiny a kompletní peritreme s interslit projekce, s výjimkou posledně jmenované ukazuje vysoce pigmentované peritreme (Obrázek 2(h)). Charakteristické rysy všech tří instarů byly shrnuty v tabulce 2.

Obrázek 2

Cephalopharyngeal kostry a zadních průduchů Hemipyrellia ligurriens larvy. Cefalofaryngeální kostry (a) 1. instar, (b) 2. instar, (c) brzy 3. instar,. a (d) pozdní 3.instar. Zadní spiracles (e) 1. instar, (f) 2.instar, (g) brzy 3. instar a (h) pozdě 3. instar. Tyče = 100 𝜇m pro všechny obrázky.

Kukla
kuklu H. ligurriens bylo typické coarctate formuláře (Obrázek 3), který měří 6.82 ± 0.27 mm na délku a 2,76 ± 0,11 mm na šířku (Tabulka 1). Pozorované změny barev odhalily, že časné pupárium bylo krémově bílé barvy (0 h), se zadním koncem stále zkráceným(obrázek 3 (a)). Barva pupária se však postupně změnila na světle žlutohnědou během 3 hodin po pupariaci (obrázek 3(b)) a poté na hnědou po přibližně 15 hodinách(obrázek 3 (f)). Barva puparia se po asi 18 hodinách pozorování změnila na tmavě hnědou (obrázek 3(g)). Po 24 hodinách ukázalo puparium nejtmavší hnědou barvu (obrázek 3 (i)). Doba trvání celé fáze kukly byla 152,5 ± 30,7 h (Tabulka 1).

(a)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

(g)

(h)

(i)

(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
(i)

Figure 3

Color changes in puparia of Hemipyrellia ligurriens up to 24 h after pupariation. Puparium (a)–(i) at 0, 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, and 24 h, respectively. Bars = 100 𝜇m for all figures.

pozorování přední a zadní části puparia se objevilo jako světle žlutohnědá barva po ošetření 10% hydroxidem draselným. Přední desky, lisované s krycím sklíčkem, bylo lichoběžníkového tvaru s 2 přední průduchy se nachází v horní konce (Obrázek 4(a)). Každý přední spiracle sestával z 5 až 7 papil (obrázek 4(b)). Páteř pozorovaný ve třetím segmentu zobrazoval řady jednocípých špiček (obrázek 4 (c)). Každý zadní spiracle objevil tři vysoce pigmentované tmavě hnědé spiraculární štěrbiny, s vysoce pigmentovaným knoflíkem a slabě pigmentovaným pobřišnicí (obrázek 4(d)).

(a)

(b)

(c)

(d)

(a)
(b)
(c)
(d)

Figure 4

Puparium of Hemipyrellia ligurriens after treating with 10% KOH. (a) Anterior plate with trapezoid shape. (b) Anterior spiracle with 6 papillae. (c) vzorek páteře ve 3. segmentu ukazující jednobodový hrot. d) zadní spirály. Tyče = 100 𝜇m pro všechny obrázky.

Dospělé
dospělý H. ligurriens byl 12.23 ± 0.61 mm na délku, 2.85 ± 0,25 mm na šířku (Tabulka 1), a kovové mědi zelené v vzhledu, s šedavě bílé pollinose na přední část hrudníku (Obr. 5(a) a 5(b)). Hlava samice byla dichoptická, ale samec byl subholoptický (Obrázky 5(c) a 5 (d)). Šedivý obličeje pollinosity byl nalezen u obou pohlaví (Čísla 5(c) a 5(d)), a celý třetí anténní segmentu byla tmavě hnědá nebo oranžová ventrálně (Obr. 5(c) a 5(d)). Squama byl bělavý (obrázek 5 (e)). Gena byla pokryta černými chlupy (obrázek 5 (f)). Kmenová žíla byla bez setul (obrázek 5(g)). Na hrudníku byly nalezeny dvě postsuturální acrostichal setae (obrázek 5 (h)). Supraconvexita byla nalezena pilose vlasy (obrázek 5 (i)). Všechny výše uvedené vlastnosti byly důležité pro identifikaci této mouchy dospělé.

(a)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

(g)

(h)

(i)

(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
(i)

Figure 5

Adults and important characteristics for identification of Hemipyrellialigurrien. (a) Dorsal view of the female. (b) Dorsal view of the male. (c) Frons of the female showing dichoptic eyes. (d) Frons of the male showing subholoptic eyes. e) boční pohled na dospělého ukazující bělavé squamae (šipka). (f) větší zvětšení hlavy ukazující černé chlupy na genu (šipka). g) křídlo ukazující kmenovou žílu bez setul (šipka). h) hřbetní hrudník. (i) Pilose vlasy na supraconvexity (šipka). Tyče = 200 𝜇m pro všechny obrázky.

3.2. Hodnocení rychlosti vývoje

hodnocení rychlosti vývoje h. ligurriens bylo stanoveno během období šetření na základě přirozeného okolního stavu provincie Phitsanulok. Růstová křivka larvální fáze ukázala sigmoidní formu (obrázek 6). Údaje o vývoji kurzu chovu ukázal, že doba vývoje od nově vylíhlé larvy na začátku pupariation rychle roste v celkem období 108 h. Larvy dosáhly své maximální střední délka v ≈42 h, a pupariation došlo v 108h. Život, který pokrývá všechny etapy byly také shrnuty v Tabulce 1.

Obrázek 6

Vztahu mezi vývojové čas a larvální délka Hemipyrellia ligurriens za přírodních okolních podmínek (26.7 ± 0.61°C; 74 ± 3% RH) provincie Phitsanulok v severním Thajsku.

4. Diskuse

údaje týkající se důležitých charakteristik hmyzu pro rychlou a spolehlivou identifikaci a vývoj v laboratoři jsou zásadními předpoklady pro vhodné použití ve forenzním vyšetřování. H. ligurriens je forenzně důležitý druh mouchy, který byl zaznamenán ve forenzních případech v Malajsii a Thajsku . Tato studie se zaměřila na důležité vlastnosti pro identifikaci všech fází h. ligurriens, na základě pozorování pod světelným mikroskopem a vývojové dobu každé fáze v přírodních podmínkách okolí s průměrné teploty a relativní vlhkosti, které byly 26.7 ± 0.61°C a 74 ± 3%, resp. Ačkoli morfologie v některých fázích H. ligurriens byl zkoumán dříve pomocí rastrovací elektronový mikroskop a světlo mikroskop , tato studie poskytla podrobnější informace na charakteristické rysy a nové stopy pro identifikaci pomocí jednoduché techniky, aby se zvýšila přesnost a preciznost forenzní aplikace v budoucnosti. Tato studie navíc poskytla vývojová data h. ligurriens, která mohou být použita při odhadu PMI mrtvol, na kterých tento druh mouchy kolonizoval.

Choriová plastika, stejně jako šířka a délka Střední plochy byly dříve uváděny jako důležitá charakteristika Při identifikaci mouchy . Morfologie H. ligurriens vejce, pozorované v této studii barvením s 1% manganistanu draselného a pozorujte pod světelným mikroskopem, byl podobný jako u předchozí práce, které zkoumána pomocí rastrovacího elektronového mikroskopu . Proto výsledky této studie potvrdily účinnost metody barvení, kterou inicioval Sukontason et al. , pro účely identifikace muchomůrek. Obarvená vejce byla jasně pozorována pod světelným mikroskopem. Při porovnávání údajů s předchozími studiemi, velikost H. ligurriens vejce v této studii byla větší, než je další rána letí, jako Lucilia cuprina, Ceylonomyia (= Chrysomya) nigripes, a Aldrichina grahami; nicméně, jeho velikost se neliší od velikosti Chrysomya megacephala a Achoetandrus (= Chrysomya) rufifacies . Nicméně, velikost létat vejce nemohou být použity jako primární vlastnosti pro identifikaci, podle informací z Erzinclioglu , který uvádí, že velikost létat vejce závisí na dietní úrovně. Proto, identifikace létat vejce by měly používat vlastnosti šířka plastron, morfologie plastron okolí micropyle jako hlavní kritéria a použití velikosti jako doplňkové funkce pro vejce identifikace .

na Základě našich referencí, tato studie byla první studie, které ukazují morfologii cephalopharyngeal kostru a zadní průduch ve všech instaru pozorování pod světelným mikroskopem. Cefalofaryngeální kostry a zadní spiracles larev byly jasně viděny jako odlišné v každém instaru. Výsledky této studie souhlasily s předchozími zprávami . Kromě toho tato studie ukázala stupeň pigmentace peritrému v každém instaru. Může to být nové vodítko pro rozlišení věku larev, zejména mezi časným a pozdním instarem. S každou vývojová stadia určitě, že se liší, stejně jako stupeň pigmentace, data z této studie mohou být užitečné při určování larválních stádií a stáří larvy tohoto rána létat v detailu, jak bylo uvedeno výše.

studie morfologie stádia pupalu poskytla výsledky, které byly podobné předchozím zprávám . Výsledky z pozorování ve zbarvení mění v čase H. ligurriens jediná kukla byla poprvé hlášena v této studii a může být další nové podpůrné důkazy k určení alespoň přibližné stáří jediná kukla pro zvýšení přesnosti PMI hodnotu.

tato studie prokázala některé fotografie charakteristických rysů pro použití při identifikaci dospělých h. ligurriens. Tyto fotografie zvláštních charakteristik z této studie mohou být užitečné pro lidi, kteří nejsou obeznámeni s terminologií v taxonomických klíčích. Současný taxonomický klíč pro identifikaci druhů mušek v Thajsku dali Kurahashi a Bunchu . Pouhým okem nonentomologa se dospělý h. ligurriens zdá podobný vzhledu a.rufifacies. Proto, šance na nesprávnou identifikaci může nastat u obou druhů, zejména v Thajsku, protože a. rufifacies byl druhým nejrozšířenějším druhem Thajska a shoda obou druhů v některých provinciích v této zemi byla nalezena .

tato studie byla první zprávou, která poskytla vývojový čas h. ligurriens ve všech stádiích. Výsledky ukázaly, že vývojové době H. ligurriens v přirozených podmínkách v této studii (průměrná teplota 26,7 ± 0.61°C a relativní vlhkost 74 ± 3%) byl rychlejší než C. megacephala a a. rufifacies, které byly studovány v průměru teplota 27,4°C . Kromě toho se doba vývoje každé fáze h. ligurriens lišila od doby vývoje C. megacephala a a. rufifacies. Byla specifikována vývojová rychlost každého druhu, i když rostly ve stejných nebo příbuzných podmínkách . Dále, variace vývojových časů v rámci druhu blow fly byla nalezena v geograficky odlišných populacích . Pro odhad larválního věku k určení PMI jsou potřebná vývojová data specifická pro místní populaci. Proto jsou údaje z této studie velmi důležité pro další použití, zejména v provincii Phitsanulok.

Data, získaná z obou morfologické charakteristiky a vývojové čas, splnit předchozí informace a poskytovat nové podpůrné důkazy pro identifikaci tohoto masařek, druhy a aplikace ve forenzní vyšetřování, zejména když H. ligurriens je přítomen v lidských mrtvol. Kromě toho mohou být v budoucnu užitečné jako základní údaje ve své biologické studii.

poděkování

tato studie byla podpořena především grantem poskytnutým n. Bunchu z Lékařské fakulty Univerzity Naresuan a další z thajského Výzkumného fondu (MRG5280194). Autoři také poděkovat Centrum Excelence v Lékařské Biotechnologie, Fakulta Zdravotnických Věd, Naresuan Univerzity a Divize Výzkumu Správy, Naresuan Univerzity, na podporu a úhradu zveřejnění nákladů.