Zdroje „Technické Resource Center „Protilátek Technické Zdroje „, Jak se polyklonální protilátky

polyklonální protilátka je sbírka manyimmunoglobulins, každý generované z různých B-buněčného klonu. Tyto protilátky se zaměřují na různé epitopy nebo vazebná místa na jediný antigen. Derivace z více klonů B-buněk a následné cílení více epitopů je to, co odlišuje polyklonální protilátky od monoklonálních protilátek.

Jak se polyklonální protilátky

Všechny generace protilátek, polyklonální nebo monoklonální, začíná vyvolat imunitní reakci, se nazývá imunizace. Zamýšlené cíle jsou injikovány do hostitele, rozpoznány imunitním systémem jako cizí, a cílené protilátkami pro imunitní zablokování nebo clearance. Selhání připojení imunitní reakce by vyžadovala použití adjuvantů, imunogenní látky, jako jsou Freund ‚ s adjuvantní nebo keyhole limpet hemocyanin (KLH), dále řídit imunitní náboru. Imunizace zahrnuje většinu toho, co je zapotřebí k vytvoření polyklonálních protilátek. Typická imunitní odpověď je popsána níže.

Tvorba Protilátek Začíná Očkování

Počáteční Expozice pro Prime Imunitní Reakci

Původní hostit expozici antigenu s, vhodné pomocné látky, expozice se nazývá „Prime“ očkování. Mezi typické metody expozice patří injekce do kůže, pobřišnice, podkožní vrstvy nebo svalu. Méně častými alternativami jsou orální a intranazální podání.Imunizace DNA je také vznikající technologií pro toxické nebo jinak obtížně produkovatelné antigeny. Jakákoli následná expozice antigenu se nazývá imunizace“ boost“.

Antigen Zpracování Antigen Prezentující Buňky

Makrofágy, Dendritické Buňky (DC), a v menší míře B-Buněk antigen prezentující buňky (Apc), internalizaci antigenu tím, že endocytóza nebo fagocytóza. Zpracování antigenu rozkládá antigen na menší kousky, které se pak přesouvají na povrch APC.

Stimulace B-Buněk

Rozpoznávání antigen prezentovaný na povrchu Apc indukuje uvolňování stimulační signálních molekul, cytokinů, od Pomocné T-Buňky. Tyto cytokiny aktivují B-buňky, které také rozpoznávají antigen prostřednictvím receptoru B-buněk (BCR). Některé B-buňky nevyžadují pomocnou aktivaci T-buněk po interakci BCR-antigenu, obvykle vyvolávají rychlejší imunitní odpověď s protilátkami s nižší afinitou. Zapojení pomocných T-buněk je rozhodující pro plnou imunitní odpověď i regulaci vlastní tolerance.

Proliferace B-Buněk a Sekrece Protilátek

Aktivuje B-Buňky se dělí na vytvoření obou paměťových B-lymfocytů a plazmatických buněk populace. Oba typy buněk rozpoznávají stejný epitop. Plazmatické buňky, které vylučují protilátky v séru imunitní uznání a zároveň paměťové B-Buňky přetrvávají po delší dobu, poskytuje rychlou reakci na sekundární expozice stejný antigen.

měření imunitní odpovědi

měření hladin protilátek během imunizačního procesu je nutné k vyhodnocení pokroku. AnELISA vůči cílovým antigen porovnává vzorky séra imunizovaných pre-imunní séra vzorky odhaluje stupeň imunitní odpovědi vedený očkování. Sériové ředění vzorků určuje titr protilátky. Typicky a 1:64,000 titr je považována za silnou imunitní odpověď a dostatečné pro řízení séru sklizně nebo lymfocytů fusion. Nižší titry mohou vyžadovat následné zesílení imunizace, alternativní způsoby podání nebo další adjuvans.

Polyklonální Protilátky v Séru Sklizně

Polyklonálních protilátek pouze vyžaduje oživení krve z hostitele zvířat a oddělení buněčné frakce ze séra frakce obsahující protilátky vylučované. Protože mnoho antigen specifických protilátek je vylučováno více aktivovanými B-buňkami, krevní sérum obsahuje mnoho produktů různých klonů protilátek, odtud termín polyklonální protilátka. Konkrétně je tvorba více klonálních protilátek proti jednomu antigenu dosažena jak zpracováním antigenu na fragmenty, tak i každým fragmentem s menšími oblastmi, nazývanými epitopy. Každý může být rozpoznán specifickými BCRs. Odlišné populace B-buněk vylučují specifické, přesto odlišné protilátky proti stejnému antigenu. Kromě toho, sérum obsahuje nejen protilátky proti zamýšlené cílové antigen, ale všechny ostatní imunoglobuliny proti jiným cílům, drogy, hormony, atd. ty jsou v séru. Sérum může být použito přímo jako sonda molekulární biologie, ale často vyžaduje další čištění, aby se zvýšila citlivost a specificita konkrétního testu. Afinitní purifikace protilátek dosahuje oživení v různé míře v závislosti na technice, jak je uvedeno níže, nicméně žádný dosažení epitop úrovni specificita monoklonální protilátky.

Polyclonal Antibody Applications

Polyklonální Protilátky Související Služby

OurPolyExpress™ service je nákladově efektivní a rychlý způsob, jak dělat vlastní molekulární sondy. Od antigenní sekvence k dodaným protilátkám za 45 dní zaručeno. Hledáte ještě větší kontrolu nad vývojem protilátek? Podívejte se na některé z našich dalších služeb protilátek:

• imunizace DNA, naše specialita. Pro zahájení jakéhokoli projektu vývoje protilátek. Obchází produkci proteinového antigenu in vitro a zabývá se obtížnými cíli.
• MonoExpress™ protilátka servisní služba nese špičkové aplikační záruky, zajištění úspěchu ve svých testech.
• Anti-idiotypové protilátky usnadňují PK nebo PD testování terapeutických protilátek. Detekují pouze CDR cílové protilátky.

s 12 lety zkušeností s vývojem přizpůsobených protilátek je váš projekt v odborných rukou. Získejte nabídku ještě dnes!

Citace a Objednávání

Naši zástupci zákaznického servisu jsou k dispozici 24 hodin denně, od pondělí do pátku.